Lazer konfokal mikroskobun çalışma prensibi
Lazer eş odaklı mikroskopi, lazer tarama cihazının eklenmesiyle floresans mikroskobu görüntülemesine, bilgisayar görüntü işlemenin kullanılmasına, optik görüntülemenin çözünürlüğünün %30 - 40% oranında arttırılmasına, floresanın ultraviyole veya görünür ışık uyarılmasının kullanılmasına dayanmaktadır. Ca2+, PH, membran potansiyeli vb. gibi fizyolojik sinyalleri ve hücresel morfoloji değişikliklerini gözlemlemek için hücre altı düzeyde hücrelerin veya dokuların iç mikro yapısının floresans görüntüsünü elde etmek amacıyla problar kullanılır hale geldi. Morfoloji, moleküler biyoloji, sinir bilimi, farmakoloji, genetik ve diğer alanlarda yeni nesil güçlü araştırma araçları. Lazer eş odaklı görüntüleme sistemi, morfoloji, moleküler biyoloji, sinir bilimi, farmakoloji, genetik vb. alanlarda güçlü yeni nesil araştırma araçlarıdır. Lazer konfokal görüntüleme sistemi, çeşitli lekeli, lekesiz ve floresan etiketli doku ve hücreleri vb. gözlemlemek, doku bölümlerinin ve hücrelerin in vivo büyümesini ve gelişimini gözlemlemek ve incelemek ve hücre içi araştırma ve ölçüm yapmak için kullanılabilir. Maddelerin taşınması ve enerji dönüşümü. Canlı hücrelerdeki iyon ve PH değişiklikleri (RATIO), nörotransmitter araştırması, diferansiyel girişim ve floresans tomografisi, çoklu floresans tomografisi ve örtüşme, floresans göstergelerinin floresans spektroskopisi analizi, zaman floresans örneklerinin kantitatif analizi çalışmalarını gerçekleştirebilmektedir. doku ve hücrelerin üç boyutlu dinamik yapısının gecikmeli taraması ve dinamik bileşenleri, floresans rezonans enerjisi transferinin analizi, floresans yerinde hibridizasyon araştırması (FISH), hücre iskeleti araştırması (FISH) ve hücre iskeleti çalışması. FISH), hücre iskeleti araştırması, gen lokalizasyon araştırması, yerinde gerçek zamanlı PCR ürün analizi, floresan ağartma geri kazanım araştırması (FRAP), hücreler arası iletişim araştırması, proteinler arası araştırma, membran potansiyeli ve membran akışkanlığı araştırması vb. görüntü analizi ve üç boyutlu yeniden yapılandırma ve diğer analizlerin analizi.
Lazer konfokal mikroskop sistemi uygulama alanları:
Tıp, hayvan ve bitki bilimsel araştırmaları, biyokimya, **oloji, hücre biyolojisi, doku embriyosu, gıda bilimi, genetik, farmakoloji, fizyoloji, optik, patoloji, botanik, sinir bilimi, deniz biyolojisi, malzeme bilimi, elektronik bilimi, mekanik, petrolü içerir jeoloji, mineraloji.
Temel prensipler
Geleneksel optik mikroskop, bir alan ışık kaynağı kullanır; numune üzerindeki her noktanın görüntüsü, komşu noktalardan gelen ışığın kırınımı veya saçılması nedeniyle engellenecektir; Lazer konfokal mikroskop, numunenin odak düzlemindeki her noktayı taramak için bir nokta ışık kaynağı oluşturmak üzere aydınlatıcı iğne deliğinden geçen bir lazer ışını kullanır; numune üzerindeki ışınlanmış nokta, tespit iğne deliğinde görüntülenecek ve daha sonra tarafından alınacaktır. nokta çoğaltma tüpünden (PMT) veya soğuk elektrokaplin cihazından (cCCD) sonra iğne deliğini nokta nokta veya satır satır tespit eder ve ardından bilgisayar monitöründe hızla görüntülenir. Prob iğne deliğinin arkasındaki PMT veya cCCD tarafından nokta nokta veya satır satır alınan floresan görüntü, bilgisayar monitör ekranında hızla oluşturulur. Aydınlatma iğne deliği ve algılama iğne deliği, objektif merceğin odak düzlemine göre eşleniktir, odak düzlemindeki noktalar aynı anda aydınlatma iğne deliğine ve emisyon iğne deliğine odaklanır ve odak düzleminin dışındaki noktalar, Elde edilen eş odaklı görüntü numunenin optik bir kesiti olacak şekilde, tespit iğne deliğinde görüntülenebilir ve bu, sıradan mikroskoptaki görüntünün bulanıklaşması dezavantajının üstesinden gelir.
