Multifoton Lazer Taramalı Mikroskopların Güçlü Yönleri ve Sınırlamaları
Avantajları aşağıdaki gibidir:
1. Kırmızı veya kızılötesi ışıkla uyarılan ışığın saçılımı küçüktür (küçük parçacıkların saçılması, dalga boyunun dördüncü kuvvetiyle ters orantılıdır).
2. İğne deliklerine gerek yoktur, görüntüleme kesitinden daha fazla dağınık foton toplayabilir-.
3. İğne delikleri, odaklanmamış veya odak alanlarından yayılan dağınık fotonları ayırt edemez ve çoklu fotonlar, derin görüntülemede daha iyi sinyal-gürültü- oranına sahiptir.
4. Tek foton uyarımı için kullanılan ultraviyole veya görünür ışık, ışın odak düzlemine ulaşmadan önce örnek tarafından kolayca emilir ve zayıflatılır, bu da derin katmanların uyarılmasını zorlaştırır.
5. Biyolojik mikroskopi gözlemi açısından ilk husus, organizmanın aktif durumuna zarar vermemek ve su, iyon konsantrasyonu, oksijen ve besinlerin dolaşımını sürdürmektir. Işık gözlemi alanında hem termal hem de foton enerjisinin ışınlama dozu içerisinde kalması ve hücrelere zarar vermeyen ışık enerjisinin olması gerekmektedir.
6. Multifoton mikroskobunun da birçok avantajı vardır. Üç-boyutlu çözünürlük, derinlik istilası, saçılma verimliliği, arka plan ışığı, sinyal-gürültü oranı, kontrol vb. açısından lazer mikroskopları, önceki lazer mikroskoplarının sahip olmadığı benzersiz veya üstün özelliklere sahiptir.
Multifoton eş odaklı lazer tarama mikroskobu, çeşitli araştırma ve uygulama alanlarına genişletildi. Doğal hallerinde numuneler üzerinde üç-boyutlu-tahribatsız gözlem gerçekleştirebilir ve sistemin çözünürlüğünü ve sinyal-gürültü{- oranını iyileştirebilir. Çok foton uyarımı sonrasında malzeme özelliklerinde meydana gelen değişikliklerden yararlanılarak, üç-boyutlu yükseklik verisi depolama ve yüksek uygulama alanına sahip herhangi bir yönde üç-boyutlu mikro imalat da gerçekleştirilebilir. değer Çok fotonlu eş odaklı mikroskopi ile ilgili mekanik, malzeme ve lazer teknolojilerinin daha da gelişmesiyle, çok fotonlu eş odaklı lazer tarama mikroskobunun daha fazla gelişme ve daha geniş uygulamalara sahip olacağına inanılabilir.
Dezavantajları aşağıdaki gibidir:
1. Yalnızca floresans görüntüleme için.
2. Numunenin pigmentler gibi uyarım ışığını emebilen kromoforlar içermesi durumunda numune termal hasara maruz kalabilir.
3. Çözünürlük biraz azalır, ancak aynı odaklı küçük deliklerin aynı anda kullanılmasıyla iyileştirilebilmesine rağmen sinyal kaybı olacaktır.
4. Pahalı ultra hızlı lazerlerin sınırlamaları nedeniyle, multifoton taramalı mikroskopların maliyeti nispeten yüksektir.
