Elektron mikroskobu için örnek işleme yöntemleri ve adımları
Biyolojik numuneleri gözlemlemek için transmisyon elektron mikroskobu kullanmadan önce numunelerin ön işleme tabi tutulması gerekir. Bilim adamları, farklı araştırma gereksinimleri gerektirdiğinden farklı işleme yöntemleri kullanırlar.
Fiksasyon: Numuneyi mümkün olduğu kadar korumak amacıyla numuneyi sertleştirmek için glutaraldehit, yağı boyamak için ise osmik asit kullanılır.
Soğuk sabitleme: Numune sıvı etan içinde hızla dondurulur, böylece su kristalleşmez ve bunun yerine amorf buz oluşur. Bu şekilde korunan numunelerde hasar daha az olur ancak görüntünün kontrastı çok düşüktür.
Dehidrasyon: Suyu değiştirmek için etanol ve aseton kullanın.
Dolgulu: Örnek dolgulandıktan sonra bölünebilir.
Segmentasyon: Numune bir elmas bıçak kullanılarak ince dilimler halinde kesilir.
Boyama: Kurşun veya uranyum gibi ağır atomlar, elektronları hafif atomlara göre daha güçlü şekilde saçarlar ve bu nedenle kontrastı arttırmak için kullanılabilirler.
Metalleri gözlemlemek için transmisyon elektron mikroskobu kullanmadan önce numunenin
Elektron mikroskobu altında virüsler
Çok ince dilimler halinde kesmek (yaklaşık 0,1 mm) ve ardından metali inceltmeye devam etmek için elektrolitik cilalama kullanmak genellikle numunenin merkezinde, elektronların oradaki çok ince metalden geçebileceği bir delik oluşmasıyla sonuçlanır. Elektrolitik olarak parlatılamayan metaller veya silikon gibi iletken olmayan veya iletkenliği zayıf olan malzemeler genellikle mekanik olarak inceltilir ve ardından iyon darbesi kullanılarak işlenir. İletken olmayan numunelerin taramalı elektron mikroskobunda statik elektrik biriktirmesini önlemek için yüzeylerinin iletken bir tabaka ile kaplanması gerekir.
Elektron mikroskopları neden daha yüksek çözünürlüğe sahiptir?
Adından da anlaşılacağı gibi elektron mikroskobu, aydınlatma kaynağı olarak elektron ışınlarını kullanan bir mikroskoptur. Elektron ışını, harici bir manyetik alanın veya elektrik alanının etkisi altında bükülebildiğinden, camdan geçen görünür ışığınkine benzer bir kırılma olgusu oluşturduğundan, bu fiziksel etkiyi elektron ışını için bir "mercek" oluşturmak için kullanabiliriz, böylece Bir elektron mikroskobu geliştiriyorum. Transmisyon elektron mikroskobunun (TEM) özelliği, taramalı elektron mikroskobundan (Taramalı Elektron Mikroskobu, SEM) farklı olarak numuneden görüntüye geçen elektron ışınlarını kullanmamızdır. Elektron dalgalarının dalga boyu, görünür ışığın dalga boyundan çok daha küçük olduğundan (100kV elektron dalgasının dalga boyu 0,0037nm iken mor ışığın dalga boyu 400nm'dir), optiğe göre Teorik olarak, elektron mikroskoplarının çözme gücünün optik mikroskoplardan çok daha iyi olmasını bekleyebiliriz. Aslında modern elektron mikroskoplarının çözünürlük kapasitesi 0,1 nm'ye ulaşmıştır. Lise son sınıf öğrencilerine yönelik seçmeli fizik ders kitabı bunu daha ayrıntılı olarak açıklıyor (fotoelektrik etkinin arkasındaki küçük bilgi)
