Bakterilerin gözlemlenmesi optik mikroskop kullanılarak yapılmalıdır.
Nesneleri büyütmek ve gözlemlemek için hassas bir araç olan optik mikroskoplar, farklı türdeki örnekleri gözlemleyebilir. Mikrobiyal araştırma, bitki araştırması ve hayvan araştırması gibi sektörlerdeki kullanıcıların bakteri büyüklüğünün seviyesini görmesi gerekir. Peki bu tür örnekleri incelerken nasıl bir mikroskop kullanılmalıdır? Bu makale ayrıntılı bir analiz sunmaktadır.
Bu sorunun cevabı bakteri gövdesinin büyüklüğü, insan gözünün çözünürlüğü ve mikroskop gibi yönlerden tartışılabilir.
1. Bakteri cisimlerinin boyutu genellikle Escherichia coli'yi örnek alarak mikrometre ölçeğindedir: uzunluk yaklaşık 1 um ve genişlik yaklaşık 0,5 um'dir.
2. Çözünürlük, iki nesne noktası arasındaki açıkça ayırt edilebilen küçük mesafeyi ifade eder.
Mikroskobun çözünürlüğü, mikroskopla büyütülüp görüntülendikten sonra açıkça ayırt edilebilen iki nesne noktası arasındaki küçük mesafeyi ifade eder.
Bir cihazın çözünürlüğü, ölçülen nesnenin mikro yapı bilgisini sağlama yeteneğini ifade eder. Çözünürlük ne kadar yüksek olursa, sağlanan bilgiler de o kadar ayrıntılı olur. Amplifikasyon sınırının ötesindeki amplifikasyona geçersiz amplifikasyon denir ve yapı hakkında daha detaylı bilgi sağlayamaz.
3. İnsan gözünün çözünürlüğü 0,1 mm'dir; bu, yeterli ışık ve 1 ft'lik bir mesafe altında insan gözünün iki nokta arasında ayırt edebileceği minimum mesafenin 0,1 mm olduğu anlamına gelir. .
4. Özetle, bakteri varlığını görmek için büyütmenin en az 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5=200 katı olması gerekir. Ancak bu büyütmede görülen bakteri (Escherichia coli) sadece küçük bir noktadır ve daha detaylı yapısal bilgi görebilmek için mikroskobun büyütülmesini arttırmak gerekir.
5. Sıradan bir optik mikroskobun çözünürlüğü, görünür ışığın dalga boyuyla (390-770nm) sınırlıdır ve genellikle sıradan bir optik mikroskobun büyütme sınırı olan 1000 katı aşmaz. 1000 katı aşan büyütme daha detaylı yapısal bilgi sağlayamaz, bu da etkisiz büyütme kapsamına girer.
6. Bir elektron mikroskobunun büyütmesi 800.000 kata ulaşabilir ve temel prensibi, yüksek basınç yoluyla kısa dalga boyunda elektron dalgaları üreten sıradan bir optik mikroskobunkiyle aynıdır.
400 kat (10x, 40x) yakınlaştırdığınızda bakterileri zar zor görebilirsiniz, ancak bunlar yalnızca küçük noktalar gibi bir iğne ucu boyutundadır. Genel olarak gözlem için hala 1000 kat (10x, 100x) yakınlaştırma yapıyoruz ve bu sırada, flagella'nın özel olarak boyanmasından sonra bile bakterilerin görünümü hala net bir şekilde görülebiliyor. 1000 kat büyütmek için yağlı mercek kullanılması gerekir. Yağ merceği olarak adlandırılan mercek, objektif merceği ile kapak camı arasına bir damla sedir yağı damlatılması anlamına gelir. Sedir yağının ışık kırılma indeksi havanınkinden daha yüksektir, bu nedenle daha büyük bir büyütme kullanılabilir.
10x ve 40x, merceğin 10x ve 40x oranında büyütüldüğünü gösterir. Bu mikroskobun toplam büyütmesini elde etmek için göz merceğinin büyütülmesi objektif merceğin büyütülmesiyle çarpılır. Bir lise mikroskobunun göz merceği ve objektif merceği değiştirilebilir ve mercek genellikle 5x veya 10x'tir. Küçük bir mikroskobun göz merceği genellikle yalnızca 10x'tir ve E. coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis ve Bacillus megaterium (sporları gözlemlemek için kullanılır) açısından incelenmiştir.
