Ters Mikroskoplar ve Floresan Mikroskoplar Arasında Seçim Yapmaya Giriş
Mikroskop, hücre kültürü ve ilgili türev deneylerde önemli bir araçtır. Şu anda piyasada çeşitli mikroskop türleri bulunmaktadır ve ihtiyaçları karşılayan ve uygun olan mikroskobu seçmek zorlu bir iştir. Aşağıda, kolay seçim için ters mikroskopların ve floresans mikroskopların prensiplerini tanıtacağız.
Ters bir mikroskobun bileşimi normal bir mikroskobunkiyle aynıdır ve esas olarak üç bölümden oluşur: mekanik kısım, aydınlatma kısmı ve optik kısım. Ters çevrilmiş bir mikroskobun bileşimi, objektif merceği ve aydınlatma sisteminin tersine çevrilmesi dışında, ilki sahnenin altında ve ikincisi sahnenin üstünde olacak şekilde normal bir dik mikroskopla aynıdır. Bu yapı, aydınlatma odaklama sistemi ile sahne arasındaki etkili mesafenin önemli ölçüde artmasına olanak tanıyarak, kültür kapları ve hücre kültürü şişeleri gibi daha kalın gözlem aletlerinin yerleştirilmesini kolaylaştırır (tabii ki cam slaytlar da kabul edilebilir), objektif mercek ile malzeme arasındaki çalışma mesafesinin çok büyük olmasına gerek yoktur. İnvert mikroskop, tıp ve sağlık kurumları, üniversiteler ve araştırma enstitüleri tarafından mikroorganizmaları, hücreleri, bakterileri, doku kültürünü, süspansiyonları, çökeltileri vb. gözlemlemek için kullanılır. Kültür ortamında hücre ve bakteri üreme ve bölünme sürecini sürekli olarak gözlemleyebilir ve bu işlem sırasındaki herhangi bir durumu yakalayabilir. Sitoloji, parazitoloji, onkoloji, immünoloji, genetik mühendisliği, endüstriyel mikrobiyoloji, botanik vb. alanlarda yaygın olarak kullanılmaktadır.
Floresan mikroskobu, hücrelerin içindeki maddelerin emilimini, taşınmasını, dağılımını ve lokalizasyonunu incelemek için kullanılır. Test edilen nesne için floresans üretmenin iki yolu vardır: UV ışınlamasından sonra doğrudan floresans yayan spontan floresans; İkincil floresans, gözlemlenen nesnenin floresan boyalarla işlenmesi ve ardından floresans yaymak için ultraviyole ışıkla ışınlanmasıyla ortaya çıkar. Hücrelerdeki klorofil gibi bazı maddeler ultraviyole radyasyona maruz kaldıklarında kendiliğinden floresans üretir; Bazı maddelerin kendisi floresans yayamaz, ancak floresan boyalar veya floresan antikorlarla boyanırsa, ultraviyole ışıkla ışınlandıktan sonra ikincil floresans da yayabilir. Floresan mikroskobu, belirli bir dalga boyunda ışık (ultraviyole ışık 365 nm veya mor mavi ışık 420 nm) bir renk filtre sistemi aracılığıyla uyarma ışığı olarak yaymak için yüksek verimli bir nokta ışık kaynağı kullanır; bu, numune içindeki floresan maddeleri çeşitli floresan renkleri yaymak için heyecanlandırır ve ardından objektif merceğin ve göz merceğinin büyütülmesi yoluyla gözlemler. Bu sayede güçlü bir arka plandaki zayıf floresansta bile tanınması kolay ve duyarlılığı yüksektir. Esas olarak hücre yapısı, fonksiyonu ve kimyasal bileşiminin incelenmesi için kullanılır.
