Floresan mikroskobu kullanım yöntemleri ve önlemler
Kullanım metodu:
(1) Malzeme sayfasını taşıyıcı tablaya yerleştirin.
(2)Floresan mikroskobu voltaj regülatörünü açın. Daha sonra, UV lambasını ateşlemek için başlatma grubuna basın, UV lambası 15 dakika boyunca kapatılmayacak ve kapatıldıktan sonra 3 dakika boyunca yeniden başlatılmayacaktır.
(3)Uyarma filtresini v'ye, dikroik filmi v'ye çevirin, 495 veya 475nm engelleme filtresini seçin.
(4) Objektif lens mikroskobu alan uvFL40, uvFL100 floresansını seçin.
(5) Slayta floresan olmayan yağ ekleyin, önce 40 x, ardından 100 x odaklama mikroskobu. Floresansı göster.
(7) Floresan materyalin ultraviyole ışınımı ile floresansın büyümesiyle birlikte zamanla yavaş yavaş zayıflaması nedeniyle, mikroskopik incelemede görüş alanı sık sık değiştirilmelidir.
(8) ayrıca uvFL10 veya uvFL20 düşük büyütmeli mikroskopi malzemesini de kullanabilir (floresan olmayan yağ eklemeden düşük büyütmeli).
Floresan görüntü kayıt yöntemi:
Floresan mikroskobu tarafından görülen floresans görüntüsü, biri morfolojik özelliklere sahip, ikincisi floresansın rengi ve parlaklığına sahip, sonuçların değerlendirilmesinde ikisinin kapsamlı bir yargıyla birleştirilmesi gerekiyor. Sonuçlar subjektif göstergelere göre, yani işçinin görsel gözlemine göre kaydedilir. Genel niteliksel bir gözlem olarak temelde güvenilirdir. Teknoloji ve bilimin gelişmesiyle birlikte, değişen derecelerde, karar sonuçlarını kaydetmek için hücre spektrofotometresi, görüntü analizörü ve diğer araçların kullanımı gibi objektif göstergelerin kullanılması. Ancak bu araçlarla kaydedilen sonuçların aynı zamanda subjektif yargılarla da birleştirilmesi gerekir.
Floresan mikroskobu fotoğraf teknolojisi, floresans görüntülerinin kaydedilmesi için çok gereklidir, çünkü floresansın solması ve zayıflaması kolaydır, fotoğraf sonuçlarının anında kaydedilmesi sağlanır. Yöntem temel olarak sıradan mikrografiyle aynıdır. Sadece ASA200 üstü veya 24. üstü gibi yüksek hızlı fotoğraf filmi kullanmanız yeterli. Ultraviyole ışık, FITC işaretleri gibi floresans patlaması etkisine sahip olduğundan, ultraviyole ışık ışınımı 30'larda, floresans parlaklığı %50 oranında azaldı. Bu nedenle pozlama hızı floresans görüntüsünü yakalamak için çok yavaştır. Genel araştırma floresans mikroskopları yarı otomatik veya tam otomatik mikrofotografi sistemi cihazlarına sahiptir.
Önlemler:
(1) Floresan mikroskop fabrika kılavuzunun gerekliliklerine tam olarak uygun şekilde çalışın, prosedürü keyfi olarak değiştirmeyin.
(2) Muayene karanlık odada yapılmalıdır. Karanlık odaya girdikten sonra, güç kaynağını bağlayın, ultra yüksek basınçlı cıva lambasını 5-15 dakika kadar yakın, ışık kaynağının stabil hale gelmesi için güçlü bir ışık yaymasını ve gözler tamamen karanlık odaya adapte olmasını bekleyin ve daha sonra numuneyi gözlemlemeye başlayın.
(3) Ultraviyole ışığın gözlere zarar vermesini önlemek için ışık kaynağı ayarlanırken koruyucu gözlük takılmalıdır.
(4) her seferinde 1 ~ 2 saatin uygun olup olmadığını kontrol edin, 90 dakikadan fazla, ultra yüksek basınçlı cıva lambasının ışık yoğunluğu giderek azaldı, floresans zayıfladı; 3 ~ 5 dakika boyunca ultraviyole ışıkla ışınlanan örneklerde floresans da önemli ölçüde zayıflar; bu nedenle * 2 ~ 3 saatten fazla olmayacaktır.
(5) floresans mikroskobu ışık kaynağı ömrü sınırlıdır, zamandan tasarruf etmek ve ışık kaynağını korumak için numunenin merkezi muayenesi yapılmalıdır. Sıcak olduğunda fan soğutması eklenmeli, yeni ampulün kullanım süresi başından itibaren kaydedilmelidir. Lamba söndürülüp tekrar kullanılmak istendiğinde, aydınlatmadan önce ampulün yeterince soğutulması gerekir. Işık kaynağından birkaç kez kaçınılmalıdır.
(6) Floresans zamanla giderek azalacağından numuneyi boyamadan hemen sonra gözlemleyin. Numunenin 4 derecede saklanan bir polietilen plastik torbaya yerleştirilmesi durumunda, floresansın zayıflaması süresi geciktirilebilir ve sızdırmazlık maddesinin buharlaşması önlenebilir.
(7) Floresan parlaklığına ilişkin değerlendirme kriterleri: genellikle dört seviyeye ayrılır, yani 'bir' - zayıf floresan yok veya görünür. '+' - yalnızca net görünür floresans. '+ +' - parlak bir ışıkla görünür
