Doğrudan mikrobiyolojik mikroskopi sayma yöntemi için deneysel prosedür
1. Seyreltme
Uygun seyreltme için Saccharomyces cerevisiae süspansiyonu, kalın olmayan bakteriyel sıvı seyreltilemez.
2. Sayma odasının ayna muayenesi
Numune eklemeden önce sayım plakasının sayım bölmesi incelenmelidir. Kir varsa saymadan önce temizlenmesi gerekir.
3. Örnek ekleme
Temiz ve kuru hematokrit plakası bir lamel ile kaplanır ve daha sonra aseptik ince ağızlı büret lamel damlalarının kenarından bira mayası sıvısı ile seyreltilir (çok fazla olmamalıdır), böylece bakteriyel sıvı boşluk boyunca kılcal sızma yoluyla içeri girer. sayma bölmesi, genel sayma bölmesi bakteriyel sıvı ile doldurulabilir. Hava kabarcığı kalmaması gerektiğini unutmayın.
4. Mikroskop sayımı
5 dakika dinlendikten sonra kan sayma plakasını mikroskop taşıyıcı tablasına yerleştirin, önce düşük büyütmeli sayım haznesinin yerini bulun ve ardından sayma için yüksek büyütmeye geçin. Bakteriyel sıvının saymadan önce çok kalın veya çok ince olduğu tespit edilirse, seyreltmenin saymadan önce yeniden ayarlanması gerekir. Genel olarak numune seyreltmesi her küçük hücrede yaklaşık 5-10 organizma gerektirir. Her sayım odası için 5 orta bölmedeki (orta bölmenin 4 köşesi ve merkezi seçilebilir) organizmalar sayılır. Izgara çizgilerinde yer alan bakteriler genellikle yalnızca üst ve sağ çizgilerde sayılır. Maya tomurcuklanması durumunda, tomurcuklanan gövde ana hücrenin yarısı büyüklüğündeyse iki organizma sayılır. Numunenin bakteri içeriğini hesaplamak amacıyla değeri saymak için iki sayım odasından bir numunenin sayılması.
5. Hematokrit plakasının temizlenmesi
Kullanımdan sonra, kan hücresi sayma plakasını su kafesindeki su sütunu ile durulayın, sert nesneler kullanmayın ve fırçalayın, yıkayıp kurulayın veya saç kurutma makinesi ile kurutun. Plakayı mikroskobik olarak inceleyin ve her küçük bölmede herhangi bir kalıntı organizma veya başka çökelti olup olmadığını gözlemleyin. Temiz değilse temizlenene kadar yıkama tekrarlanmalıdır.
