Transmisyon floresans mikroskobu ile yansıma floresans mikroskobu arasındaki farklar, avantajlar ve dezavantajlar
1. Transmisyon floresans mikroskobu: Uyarma ışık kaynağı, floresansı uyarmak için numune malzemesi boyunca bir yoğunlaştırıcı aracılığıyla iletilir. Yaygın olarak kullanılan karanlık alan yoğunlaştırıcıları veya sıradan yoğunlaştırıcılar, uyarı ışığını ve yan ışığı numuneye dönüştürmek üzere reflektörü ayarlamak için kullanılabilir. Bu nispeten eski moda bir floresans mikroskobudur. Avantajı düşük büyütmede güçlü floresans vermesi, dezavantajı ise artan büyütmeyle floresansının zayıflamasıdır. Bu nedenle daha büyük numune malzemelerinin gözlemlenmesi daha iyidir.
2. Düşen ışınlı floresans mikroskobu: Bu, modern zamanlarda geliştirilen yeni bir tür floresans mikroskobudur. Öncekinden farklı olarak, uyarım ışığı, aydınlatma yoğunlaştırıcısı ve floresans toplamak için kullanılan objektif merceği ile aynı objektif merceğini kullanarak objektif merceğinden numunenin yüzeyine düşer. Fotouranyumla 45 derecelik açı oluşturan optik yola çift renkli ışın ayırıcının eklenmesi gerekiyor. Uyarma ışığı objektif merceğe yansıtılır ve numune üzerinde toplanır. Numune tarafından üretilen floresans ve objektif lensin ve kapak camının yüzeyinden yansıyan uyarım ışığı aynı anda objektif lense girer ve çift renkli ışın ayırıcıya geri dönerek uyarım ışığını ve floresanı ayırır. Artık uyarım ışığı daha sonra engelleme filtresi tarafından emilir. Uyarma filtreleri, çift renkli ışın ayırıcılar ve engelleme filtrelerinin farklı kombinasyonları kullanılırsa farklı floresan reaksiyon ürünlerinin ihtiyaçlarını karşılayabilir. Bu floresan mikroskobun avantajları, eşit görüş alanı aydınlatması, net görüntüleme ve daha yüksek büyütme ile daha güçlü floresanstır.
Transmisyon floresan mikroskobunun avantajları ve dezavantajları
Işık kaynağı: Yüksek basınçlı cıva lambası veya halojen lamba.
Spot ışığı aynası: Uyarma ve floresansı ayırmak için karanlık alan spot ışığının kullanılması.
Objektif mercek: Her türlü objektif mercek kullanılabilir.
Numune: İnce numuneler iletim gözlemi için daha uygundur.
Avantajları: ① Karanlık alan yoğunlaştırıcısının kullanılması nedeniyle, uyarı ışığı objektif merceğe giremez, bu da karanlık bir arka plan oluşturmayı ve iyi bir kontrast elde etmeyi kolaylaştırır ve gözlem için herhangi bir objektif mercek kullanılabilir. ② Düşük büyütmeli bir objektif kullanıldığında, yansıtıcı floresan mikroskobundan daha parlaktır.
Dezavantajı: Spot ışığının merkezi ve yüksekliğinin doğru ayarlanması gerekir, aksi takdirde parlak bir floresan görüntü elde edilemez. Karanlık alan spot ışığının odak uzaklığı sınırlaması nedeniyle kalın cam slaytlar kullanılamaz. Görüş alanının aydınlatma alanı çok büyük olmamalıdır, aksi takdirde floresan örneğinin floresan renginin solmasına neden olabilir. Kalın veya opak numuneler uygun değildir.
Yansıtıcı floresan mikroskobunun avantajları ve dezavantajları
Işık kaynağı: Yüksek basınçlı cıva lambası veya halojen lamba.
Odaklama merceği: Objektif merceği odaklama merceği görevi gördüğü için odaklama merceğine gerek yoktur.
Objektif mercek: Kullanılan objektif merceği, sayısal açıklıkta herhangi bir sınırlama olmaksızın, yeterli ultraviyole ışığı iletebilmeli ve floresansın kendisini üretememelidir.
Örnek: Hem kalın hem de opak örnekler gözlemlenebilir.
Avantajları: ① Objektif merceği aynı zamanda spot ışığı görevi de gördüğünden fazla ayar gerektirmez. ② Kolar aydınlatma yöntemini kullanarak açıklık ve görüş alanı açıklıklarının etkilerinden faydalanılabilir Objektif merceğin sayısal açıklığı sınırlı değildir ve yüksek büyütmede yüksek çözünürlüklü görüntüler de elde edilebilir Kalın veya opak numuneler de görüntülenebilir gözlemlenir ve kalın kapak kaymaları da kullanılabilir. Diğer gözlem yöntemleri de yansıyan floresans ile, özellikle faz farkı yöntemi ve iletim diferansiyel girişim yöntemiyle birleştirilebilir. Gereksiz floresans renk solması olayını önleyebilir.
Dezavantaj: Zemin büyütme objektifi kullanıldığında görüntü nispeten karanlıktır, dolayısıyla yüksek sayısal açıklık objektifi kullanılmalıdır. Filtre sistemi, uyarılma lüminesansını ve floresansını etkili bir şekilde ayırmalıdır.,
