Doku bloğunun hacmini gösteren biyolojik mikroskop
Kondansatörlü bir biyolojik mikroskop, parlaklığını orta seviyeye getirmek için yoğunlaştırıcıyı yukarı ve aşağı hareket ettirebilir ve ayrıca 9b'lik orta bir parlaklık elde etmek için değişken ışık analizörünün açıklığını değiştirebilir. Işık güneşteyse, yoğunlaştırıcı uygun şekilde yükseltilebilir ve değişken optik gürültünün açıklığı uygun şekilde genişletilebilir. Işık çok güçlüyse, kondansatör uygun şekilde alçaltılabilir ve kesişim açıklığı uygun şekilde azaltılabilir. Bu durumda hala göz kamaştırıyorsanız, uygun filtreyi seçip kondansatörün altındaki brakete yerleştirebilirsiniz. Bu tussah sizi tatmin edecek bir parlaklığa kavuşabilir. Elbette optik okumanın açıklık boyutunu değiştirmek ve uygun filtreleri seçmek için kondansatörün üst ve alt konumlarını ayarlama konusunda belirli bir süre pratik yaptıktan sonra deneyim kazanmak gerekir.
Biyomikroskopun çok önemli bir problemi, dondurarak kurutma ve reçine gömme (FD) ve dondurarak kurutma sonrasında her parçadaki 65 element içeriğinin, gözlemlenecek ve analiz edilecek hücrelere zarar vermeyecek şekilde dikkatli bir şekilde ele alınması gerektiğidir. X-ışını mikroanalizi hem birçok adımı içerdiğinden hem de çok maliyetli olduğundan, analiz edilen hücrelerin uzun süreli ve çok adımlı tedaviden sonra hasar görmüş hücreler veya ölü hücreler olması durumunda yanlış bir sonuca varmak çok üzücüdür. Örneğin kollajenaz tedavisi ile ayrılan miyokard hücrelerinin iki formu vardır; biri uzun çubuk, diğeri yuvarlaktır. İkincisi, hücre ayrılması sırasında hasar gören ölmekte olan bir hücredir.
Bu iki tür hücredeki elektrolitlerin içeriği ve dağılımı biyolojik mikroskop altında çok farklıdır. Yuvarlak miyokardiyal hücrelerde Na çok yüksek ve K çok düşüktür ve doğrusal dendritlerdeki ca konsantrasyonu çok yüksektir. Diğer analitik yöntemlerle karşılaştırıldığında, dairesel hücrelerdeki yüksek Na ve düşük K'nın ve mitokondrideki yüksek ca'nın, hücre ayrılması sırasında hücre zarı hasarının sonuçları olduğu kanıtlanmıştır. Hücrelerin ve dokuların soğuk fiksasyon yöntemi genellikle onları önce su vererek sabitlemek, sonra da sıvı nitrojende depolamaktır. Söndürme fiksasyonu koruma etkisi açısından çok önemlidir. Canlı hücreler veya taze dokular su açısından zengindir. Söndürme sırasında, genellikle hücrelerin veya dokuların kriyoprotektanlarla doğrudan temas halinde olan kısımları (özellikle sıvı nitrojenle söndürülürken) önce dondurulur ve sabitlenir, böylece merkezi yapının donmasını ve sabitlenmesini engelleyen bir "kabuk" oluşturulur. hücrelerin bir kısmı. Bu nedenle X-ışını mikroanalizi yapılırken çoğunlukla büyük hücrelerin merkezinde buz kristallerinin olduğu bulunur. Bunun olmasını önlemek için, soğutucu madde olarak erime noktası sıvı nitrojenden yüksek fakat kuruma sıcaklığı 806°C'nin altında olan bir madde kullanılır. Bu tür pek çok madde vardır, ancak en kolay bulunabileni konsantre propandır (kaynama noktası-42．120c, erime noktası-187．10c, moleküler ağırlık-44.1), en hızlı soğutma hızı. Ancak dezavantajı yanıcılıktır.
Biyolojik mikroskop, kas lifini özel bir çerçeveye yerleştirebilir ve kas lifi belirli bir aşamaya kadar büzüldüğünde ve sabitlenmesi gerektiğinde, nozül hemen çalıştırılır, böylece sıvı propan kas lifi üzerine püskürtülerek söndürülür ve sabitlenir. BT. Daha sonra kas lifleri rafla birlikte dışarı alınarak sıvı nitrojen içerisine konulur. Kan hücreleri veya ayrılmış hücreler sabitlenmişse, hücreleri konsantre etmek için ilk önce düşük hızda santrifüjleyin, hücreleri iyi termal iletkenliğe sahip gümüş küçük bir tüpe aktarın ve küçük tüpü dondurmak ve sabitlemek için sıvı propan içine koyun. Hall laboratuvarında sıçan pankreasını sabitlerken, iki çelik blok sıvı helyum (veya sıvı nitrojen) ile önceden soğutuldu ve iki bakır blok pense ile pankreasın önüne ve arkasına yerleştirildi, böylece teyzeler söndürüldü ve sabitlendi. Doku veya hücreler söndürüldükten, sabitlendikten ve sıvı nitrojene aktarıldıktan sonra uzun süre saklanabilir.
