Işık mikroskobunun görüntüleme optik yol sisteminin ayarlanması ve mikroskobik incelemenin ana hatları
Görüntüleme Optik Yol Sisteminin ve Mikroskobik İnceleme Anahatlarının Ayarlanması
Mikroskobun görüntüleme optik sisteminin ayarlanması, farklı mikroskopi tekniklerinin ihtiyaçlarına göre gerçekleştirilir. Mikroskopi, kısaca, bir numunenin mikroskopla incelenmesi sırasında kullanılan aydınlatma yöntemi ve numunenin oluşturduğu görüntüde daha iyi kontrast elde etme tekniği ve yöntemidir. Aşağıda mikroskopinin çeşitli yöntemlerde olgunlaştığı ve ilgili mikroskop görüntüleme optik sistemi ayarlama yönteminin kısaca açıklandığı görülmektedir.
1. İletim parlak alanı:
Bu, mikroskobun icadından bu yana en geleneksel ve yaygın uygulama yöntemidir. Temel bileşenler: a. Objektif mercek: Parlak alan gözlemi için herhangi bir objektif mercek kullanılabilir; B. Tespit kapsamı: Tercihen bir açıklık diyaframıyla donatılmış her türlü tespit kapsamı kullanılabilir. Ayarlama yöntemi: Yukarıdaki mikroskobun Kuhler aydınlatma sistemi ayarlandıktan sonra parlak alan yöntemi uygulanabilir. Uygulama kapsamı: tüm lekeli doku kesitleri, kan yaymaları vb. Önlemler: a. Parlak alan gözlem yöntemini kullanırken Kuhler aydınlatma sistemi ayarlanmalıdır; B. Görüş alanının diyaframı keyfi olarak açılmamalı ve 10x, 10x'ten küçük ve 10'dan fazla objektif lensleri kullanıldığında, yoğunlaştırıcı aynanın ön merceği sırasıyla optik yola ve dışarıya doğru yerleştirilmelidir. ×; C. Kondansatör aynasının açıklık diyaframı, görüş alanının parlaklığını ayarlamak için kullanılmamalı ve kondansatör aynasının yüksekliği gelişigüzel ayarlanmamalıdır, aksi takdirde mikroskobun çözünürlüğü düşecek ve lekeli dokunun çözünürlüğü azalacaktır. hasar görecek. mikroskobun çözünürlüğü ve hasarı Kuhler aydınlatma sistemine göre ayarlandı; D. Mikrograflar için, objektif merceğinin büyütme kullanımındaki her değişiklikte, yoğunlaştırıcı merceğin açıklık diyaframını, boyutu, objektif merceğinde kullanılan 2/3 sayısal açıklığa tam olarak eşit olacak şekilde ayarlamanız gerekir.
2. İletilen ışık fazı kontrast yöntemi:
Bu, kontrast geliştirme yönteminin modern bir mikroskop incelemesidir. Temel bileşenler: faz kontrastlı objektif lens, parlak görüş alanı ve faz kontrastlı çok amaçlı tespit dürbünü, odaklanan teleskop, yeşil filtreler.
Ayarlama yöntemleri:
A. Kuhler aydınlatma sisteminin ayarlanmasına dayanarak, parlak alan yöntemini kullanarak numuneyi net bir şekilde odaklayın
B. Kadran ölçeği konumunu hizalamak için tespit kapsamını Ph1'e çevirin, 10 × faz kontrastlı objektif lensi seçin ve gözlemlenecek şeffaf numuneyi değiştirin.
C. Göz merceklerinden birini çıkarın, yerine ortalanmış bir teleskop takın ve görüş alanındaki iki fazlı kontrast halkalarına (objektif merceğin siyah faz kontrast halkası ve yoğunlaştırıcı merceğin ışık iletim fazı kontrast halkası) odaklanın.
D. Görüş alanındaki iki faz kontrast halkaları mutlaka çakışmayabilir, tespit dürbünündeki iki ayarlama cihazını ayarlayın (faz kontrast halkası ayarlama kolunun sol ve sağ konumlarını ayarlayın ve sürtünme düğmesinin ön ve arka konumlarını ayarlayın) , böylece ön ve arkadaki ışık iletim halkası sağa ve sola siyah halkayla çakışacak şekilde
e. Ayarlamadan sonra, gözlem için göz merceğine geri dönün ve numunenin faz kontrast görüntüsünü gözlemlemek için yeşil filtreyi optik yola doğru bastırın.
F. Gözlem için 20x ve 40x objektif lensler olduğunda, tespit merceği Ph2 konumuna ayarlanmalıdır ve 100 objektif mercek kullanıldığında, tespit merceği Ph3 konumuna ayarlanmalıdır.
Uygulama kapsamı: Her türlü hücre, canlı doku, lekesiz veya lekesiz doku kesitleri, suda yaşayan organizmalar vb. gibi şeffaf, lekesiz veya lekesiz numunelerin gözlemlenmesi için uygundur.
3. Diferansiyel girişim fazı kontrast yöntemi:
Görüntü etrafındaki örnek detayların bir hale eşliğinde gözlemlenmesi şeklindeki faz kontrastının üstesinden gelmek için, görülmesi gereken detayların maskelenmesinin yanı sıra numuneler veya doku kesitleri prensipte oldukça ince bir kalınlık gerektirir. 10 µm'den daha kalın olması ve diğer sınırlamalar, alt diferansiyel girişim fazı kontrast yöntemini tasarlamak için çift ışın girişim ilkesinin kullanılması.
Ayarlama yöntemleri:
A. DIC yöntemi, Kulemin sisteminin halihazırda ayarlanmış olduğu temel alınarak ayarlanmalıdır.
B. 10x objektif lens kullanarak, örneği parlak bir görüş alanıyla net bir şekilde görebilen objektif merceğin odaklanma konumunu belirleyin.
C. Polarizörü, doğu-batı yönünde yönlendirilmesi gerektiğine dikkat ederek aydınlatma yoluna yerleştirin.
D. Yoğunlaştırıcı kadranını 10 × objektif merceğinin kullanımına karşılık gelen konuma, yani DIC 0.3-0.4'e çevirin.
e. 10× objektif lens için DIC kaydırıcısını objektif merceğin arkasına veya objektif dönüştürücüye takın.
F. Analiz cihazını görüntüleme optik yoluna yerleştirin ve yönünün güney-kuzey olması gerektiğini unutmayın.
G. Gözlemlenecek şeffaf numuneyi değiştirin, numuneye net bir şekilde odaklanmak için ışık kaynağını açın.
H. DIC ek parçasını, diferansiyel girişim kontrast görüntüsünün en iyi etkiyi, yani en belirgin rahatlama etkisini elde etmesini sağlayacak şekilde ayarlayın.
Ben. Aynı zamanda, yoğunlaştırıcı aynanın açıklık diyaframını, kontrast etkisinin de optimal olacağı şekilde ayarlayın.
J. Daha sonra numunenin yapısını farklı düzeylerde görmek için numunenin ayrıntılarına ince ayar yapın.
k. Tamamlayıcı renk (birinci derece kırmızı geciktirme plakası) takılıp aynı anda DIC ek parçası ayarlanırsa görüş alanında kırmızı, turuncu, sarı, yeşil, mavi, sürekli değişen parlak renkler görülebilir. mor, pembe, pembe-mor ve altın sarısı. Uygulama kapsamı: şeffaf veya lekelenmeyen doku kesitleri, kalınlığı yaklaşık 100 µm'ye kadar, kültürdeki canlı doku ve canlı hücreler, küçük canlı organizmalar vb.
