Neden eş odaklı bir mikroskoba ihtiyacımız var?
1. Büyük öncüllerimizin çabaları ve iyileştirmeleri sonrasında optik mikroskop mükemmel bir seviyeye ulaştı. Aslında sıradan mikroskoplar bize basit ve hızlı bir şekilde güzel mikroskobik görüntüler sağlayabilir. Ancak neredeyse mükemmel olan bu mikroskop dünyasına devrim niteliğinde yenilik getiren olay gerçekleşti: "lazer taramalı eş odaklı mikroskobun" icadı. Bu yeni mikroskobun özelliği, yalnızca odağın yoğunlaştığı yüzeyden görüntü bilgisini çıkaran bir optik sistemi benimsemesidir. Elde edilen bilgileri görüntü belleğine geri yüklerken odağı değiştirerek, tam üç boyutlu bilgi zekasına sahip canlı bir görüntü elde edebilir. Bu yöntem sayesinde yüzey şekli hakkında geleneksel mikroskoplarla doğrulanamayan bilgiler kolaylıkla elde edilebilmektedir. Ek olarak, tipik optik mikroskoplar için "çözünürlüğün iyileştirilmesi" ve "odak derinliğinin derinleştirilmesi", özellikle yüksek büyütmede çelişkili koşullardır. Ancak eş odaklı mikroskoplarda bu sorun kolaylıkla çözülebilir.
2. Eş odaklı optik sistemlerin avantajları
Lazer konfokal mikroskobun şematik diyagramı
Eş odaklı optik sistem, numuneyi noktalarla aydınlatmak için kullanılırken, yansıyan ışık da bir nokta sensörü tarafından alınır. Numune odak noktasına yerleştirildiğinde yansıyan ışığın neredeyse tamamı ışığa duyarlı cihaza ulaşabilir. Numune odak noktasından saptığında yansıyan ışık ışığa duyarlı cihaza ulaşamaz. Yani eş odaklı bir optik sistemde yalnızca odak noktasıyla çakışan görüntüler çıkacak ve ışık noktası ve gereksiz dağınık ışık perdelenecektir.
Lazer neden kullanılır?
Eş odaklı optik sistemde numune aydınlatılır ve yansıyan ışık da bir nokta sensör tarafından alınır. Bu nedenle noktasal ışık kaynaklarına ihtiyaç duyulmaktadır. Lazer çok noktasal bir ışık kaynağıdır. Çoğu durumda, eş odaklı bir mikroskobun ışık kaynağı bir lazer ışık kaynağıdır. Ayrıca lazerlerin tek renkliliği, yönlülüğü ve mükemmel ışın şekli de bunların yaygın olarak benimsenmesinin önemli nedenleridir.
4. Yüksek hızlı taramaya dayalı gerçek zamanlı gözlem mümkün hale geliyor
Lazer tarama, yatay yönde Akustik Optik Deflektör (AO prime) ve dikey yönde Servo Galvano aynasını kullanır. Ses optik öngerilim ünitesinde mekanik titreşimlerin bulunmaması nedeniyle, yüksek hızlı tarama gerçekleştirmek ve izleme ekranında gerçek zamanlı olarak gözlem yapmak mümkündür. Bu tür kameraların yüksek hızlı yapısı, odaklanma ve konum alma hızını doğrudan etkileyen çok önemli bir öğedir.
5. Odak konumu ile parlaklık arasındaki ilişki
Konfokal optik sistemde, numunenin parlaklığı odak konumuna doğru yerleştirildiğinde yüksektir ve parlaklığı ondan önce ve sonra keskin bir şekilde azalır (Şekil 4'teki düz çizgi). Bu odak düzleminin hassas seçiciliği, tam olarak, eş odaklı mikroskopide yükseklik yönünün belirlenmesinin ve odak derinliğinin genişletilmesinin ardındaki prensiptir. Bununla karşılaştırıldığında, tipik optik mikroskoplar odak konumundan önce ve sonra önemli parlaklık değişiklikleri göstermezler (Şekil 4'teki noktalı çizgi).
6. Yüksek kontrast ve çözünürlük
Genellikle optik mikroskoplarda odak noktasından sapan yansıyan ışık meydana gelir.
