Optik mikroskobun objektif merceğinin ana parametreleri
Objektif merceğin ana parametreleri şunlardır:
Objektif merceğin ana parametreleri büyütme, sayısal açıklık ve çalışma mesafesini içerir.
① Büyütme, gözle görülen görüntünün boyutunun karşılık gelen örneğin boyutuna oranını ifade eder. Alan oranından ziyade uzunluk oranını ifade eder. Örnek: 100 × büyütme faktörü, 1 μ uzunluğa karşılık gelir. Büyütülmüş numunenin m uzunluğu 100 μ m'dir. Alana göre hesaplanırsa 10000 kat büyütülür.
Bir mikroskobun toplam büyütmesi, objektif ile göz merceğinin büyütmelerinin çarpımına eşittir.
② NA veya A olarak kısaltılan, açıklık oranı olarak da bilinen sayısal açıklık, objektif merceğin ve yoğunlaştırıcının ana parametresidir ve mikroskobun çözünürlüğü ile doğru orantılıdır. Kuru objektifin sayısal açıklığı 0.05-0.95'tir ve yağa batırılmış objektifin (sedir yağı) sayısal açıklığı 1.25'tir.
optik mikroskop
③ Çalışma mesafesi, gözlemlenen numunenin en net olduğu durumda, objektif merceğin ön merceğinden numunenin kapak camına kadar olan mesafeyi ifade eder. Objektif merceğin çalışma mesafesi odak uzunluğuna bağlıdır. Objektif merceğin odak uzaklığı ne kadar uzun olursa, büyütme o kadar düşük ve çalışma mesafesi de o kadar uzun olur. Örnek: 10x'lik bir hedef, 10/0,25 ve 160/0,17 ile etiketlenir; burada 10, büyütülmüş halidir amaç; 0,25 sayısal açıklıktır; 160, mercek tüpünün uzunluğudur (mm cinsinden); 0,17, kapak camının milimetre cinsinden standart kalınlığıdır. 10x'lik bir objektifin etkili çalışma mesafesi 6,5 mm, 40x'lik bir objektifin etkili çalışma mesafesi ise 0,48 mm'dir.
Optik mikroskopide en yüksek çözünürlüğü elde etmek için neden yağlı ayna kullanılmalı?
Optik mikroskoplardan biri olan yağlı ayna, daha ince yapıları gözlemlemek için mercek yağa (genellikle sedir yağı) batırıldığında kullanılır. Sıradan optik mikroskoplardan biraz daha yüksek netliğe sahip, laboratuvarda yaygın olarak kullanılan mikroskoplardan biridir ve klamidya, bakteri, organel vb. gözlemlemek için kullanılır.
Yağ merceğinin merceği çok küçüktür. Işık, cam slayt ile yağlı mercek arasındaki havadan geçtiğinde, farklı ortam yoğunluklarından dolayı kırılma veya tam yansıma meydana gelir, merceğe giren ışık miktarı azalır ve görüntü bulanıklaşır. Yağlı mercek ile cam slayt arasına camınkine (n=1.52) benzer kırılma indisine sahip sedir yağı (n=1.515) eklenirse, cama giren ışık miktarı mercek artar, görüş alanının parlaklığı artar ve görüntü parlak ve net hale gelir
Bakterilerin boyutlarının küçük olması nedeniyle, bakteri morfolojisini incelerken onları net bir şekilde gözlemlemek için genellikle mikroskop yağlı ayna kullanmak gerekir. Bu nedenle yağlı aynaların kullanım ve koruma yöntemlerine ustalıkla hakim olmak gerekmektedir.
