Mikroskop slaytları yapma yöntemi
Mikroskop slaytları hazırlamanın üç yöntemi vardır:
1. Yayma yöntemi
Smear yöntemi, malzemenin lam üzerine eşit şekilde yayıldığı bir hazırlama yöntemidir.
Smear materyalleri arasında tek hücreli organizmalar, küçük algler, kan, bakteri kültürleri, bitki ve hayvanların gevşek dokuları, sperm yuvaları, anterler vb. yer alır.
Bulaşma sırasında dikkat edilmelidir:
(1) Slayt temiz olmalıdır.
(2) Slayt düz tutulmalıdır.
3) Kaplama tekdüze olmalıdır. Kaplama sıvısı damlasını slaytın merkezinin sağına uygulayın ve bir kesme bıçağı veya kürdan vb. bıçağıyla iyice yayın.
4) Kaplama ince olmalıdır. Başka bir slaytı itici olarak kullanın, uygulama solüsyonunun damlasını (iki slayt arasındaki açı 30 ila 45 derece olmalıdır) damlatarak slaytın yüzeyi boyunca sağdan sola doğru yavaşça itin ve eşit derecede ince bir tabaka uygulayın.
5) Sabitleme. Fiksasyon gerekiyorsa, kimyasal fiksatif veya kuruma (bakteriyel) fiksasyonu kullanın.
6) Boyama. Bakteriler için metilen mavisi ve kan için Rachel'ın boyasını kullanın. Boyama çözeltisi kaplanmış yüzeyin tamamını kaplamalıdır.
7) Durulayın. Emici kağıda emdirin veya fırında kurutun.
8) Filmi kapatın. Uzun süreli depolama için Kanada ağaç filmini kullanın.
2. Film Presleme Yöntemi
Basınçlı film yöntemi, biyolojik malzemenin slayt ile kapak tabakası arasına yerleştirilerek, belirli bir basınç uygulanarak, doku hücrelerinin preslenerek birbirinden ayrılmasına yönelik bir hazırlama yöntemidir.
(1) malzemeyi alın. Hücre bölünmesinin gözlemlenmesi, hücre bölünmesinin canlı, taze doku hücreleri materyal olarak seçilmesi gerekmektedir. Kök uçları, gövde ucu meristematik dokusu, kemik iliği hücreleri, anterler (polen ana hücreleri) gibi. Sperm yuvası (spermatogonia) vb.
(2) Sabitleme. Malzeme fiksasyonu ihtiyaca göre belirlenebilir, malzeme basınç filmi gözlemi alındıktan hemen sonra ayrı bir sabit tedavi (ve senkronize boyama) yapılamaz; Malzemeyi muayeneden hemen sonra almayın, malzeme bir fiksatifle (genellikle alkol asetat fiksatifiyle) sabitlenebilir. %95 etanol ile yıkandıktan sonra 2 ~ 24 saat (malzemeye bağlı olarak) sabitlenir, %70 etanolde muhafaza edilir, beklemede kalır.
(3) Ayrışma. Hücrelerin, hidroliz ayırma çözeltisi (1N HC1 veya hidroklorik asit ve alkol çözeltisi gibi) tedavisi, genel tedavi 6 ~ 20 dakika, ayrışma ve boyamadan önce suyla durulamadan sonra malzemeyi dağıtması kolay değildir.
(4) Boyama. Pek çok leke çeşidi vardır. Kromozomların gözlemlenmesi genellikle macenta asetat boyama solüsyonu ile boyama için kullanılır.
(5) Film presleme. Malzemeyi bir slayt üzerine yerleştirin, bir damla su veya boyama solüsyonu ekleyin, lamel kapatın ve slayta baş parmağınızla hafifçe bastırın.
(6) Gözlem. Film basıldıktan sonra mikroskop altında gözlemlenebilir.
