Floresan mikroskobunun prensibi ve yapısal özellikleri
Floresan mikroskobu, numunedeki flüoresan maddeleri floresan yaymak üzere uyarmak için uyarma ışığı olarak filtre sisteminden belirli bir dalga boyundaki ışığı (3650 inç mor ötesi ışık veya 4200 inç mor mavi ışık gibi) yaymak için yüksek ışık verimliliğine sahip bir nokta kullanır. çeşitli renkler Bundan sonra, objektif merceğin ve okülerin büyütülmesiyle gözlemleyin. Bu sayede, güçlü kontrastlı bir arka plan altında, floresan çok zayıf olsa bile, tanımlanması kolaydır ve yüksek hassasiyete sahiptir. Esas olarak hücre yapısı ve işlevi ile kimyasal bileşimin araştırılması için kullanılır. Floresan mikroskobunun temel yapısı, sıradan bir optik mikroskop ve bazı aksesuarlardan (floresan ışık kaynağı, uyarma filtresi, iki renkli ışın ayırıcı ve bloke edici filtre, vb.) oluşur. Floresan ışık kaynağı—genellikle çeşitli dalga boylarında ışık yayan ultra yüksek basınçlı cıva lambası (50-200W) kullanılır, ancak her floresan maddenin en güçlü floresanı üreten bir uyarma dalga boyu vardır, bu nedenle bir uyarma filtresi (Genellikle, ultraviyole, mor, mavi ve yeşil uyarma filtreleri vardır), bunlar yalnızca belirli bir dalga boyundaki uyarma ışığının diğer ışığı emerken numunenin içinden geçmesine ve ışınlamasına izin verir. Her bir madde uyarma ışığı ile ışınlandıktan sonra çok kısa bir süre içinde ışınlama dalga boyundan daha uzun dalga boyuna sahip görünür floresans yayar. Floresan spesifiktir ve genellikle uyarma ışığından daha zayıftır. Spesifik flüoresanı gözlemlemek için, objektif merceğin arkasına engelleme (veya bastırma) eklenmeli ve onunla birlikte kullanılmalıdır.
Floresan mikroskobu ve sıradan mikroskop arasındaki fark
1. Aydınlatma yöntemi genellikle episkopiktir, yani ışık kaynağı, objektif merceğinden numune üzerine yansıtılır;
2. Işık kaynağı ultraviyole ışıktır, dalga boyu daha kısadır ve çözünürlük sıradan mikroskoplardan daha yüksektir;
3. İki özel filtre vardır, ışık kaynağının önündeki filtre görünür ışığı filtrelemek için kullanılır ve mercek ile objektif merceği arasındaki filtre, insan gözünü korumak için ultraviyole ışınları filtrelemek için kullanılır.
Floresan mikroskobu aynı zamanda bir tür optik mikroskoptur, temel fark, ikisinin uyarma dalga boyunun farklı olmasıdır. Bu, yapı ve kullanım açısından floresan mikroskobu ile sıradan optik mikroskop arasındaki farkı belirler.
Floresan mikroskopi, immünofloresan sitokimyada önemli bir araçtır. Işık kaynağı, filtre plaka sistemi ve optik sistem gibi ana bileşenlerden oluşur. Numuneyi floresan yayması için uyarmak için belirli bir dalga boyunda ışık kullanmak ve objektif lensi ve oküler sistemini güçlendirerek numunenin floresan görüntüsünü gözlemlemek içindir.
