Mikroskop slaytlarının hazırlanma yöntemi
1. Yayma yöntemi
Yayma yöntemi, malzemelerin üzerine eşit şekilde kaplanarak lam hazırlama yöntemidir.
Yayma materyalleri arasında tek-hücreli organizmalar, küçük algler, kan, bakteriyel kültür ortamı, gevşek hayvan ve bitki dokuları, testisler, anterler vb. yer alır.
Bulaşma sırasında aşağıdakilere dikkat edilmelidir:
(1) Cam slayt temizlenmelidir.
(2) Cam slayt düz olmalıdır.
(3) Kaplama tekdüze olmalıdır. Damlacığı cam slaytın sağ orta kısmına uygulayın ve bir kesme bıçağı veya kürdan ile eşit şekilde dağıtın.
(4) Kaplama ince olmalıdır. Başka bir cam slaytı slayt olarak kullanarak, uygulanan sıvıyı cam slaytın yüzeyi boyunca sağdan sola doğru yavaşça itin (iki slayt arasındaki açı 30 ila 45 derece olmalıdır) ve düzgün bir ince tabaka uygulayın.
(5) Sabit. Fiksasyon gerekiyorsa, fiksasyon için kimyasal fiksatifler veya kurutma yöntemleri (bakteri) kullanılabilir.
(6) Boyama. Bakteriler metilen mavisi kullanır ve kan Wright boyama solüsyonunu kullanır. Boyama çözeltisi kaplama yüzeyinin tamamını kaplamalıdır.
(7) Durulayın. Emmek veya kurutmak için emici kağıt kullanın.
(8) Filmi kapatın. Kanada ağaç filmi kullanılarak uzun süreli koruma.
2. Tablet basma yöntemi
Sıkıştırma yöntemi, biyolojik materyalleri bir cam slayt ile bir kapak arasına yerleştirerek doku hücrelerini dağıtmak için belirli bir basınç uygulayarak dilimleme yöntemidir.
Tablet presleme yönteminin genel süreci:
(1) Malzeme seçimi. Hücre bölünmesini gözlemlemek için malzeme olarak kuvvetli hücre bölünmesine sahip taze doku hücreleri seçilmelidir. Kök ucu, gövde ucu meristemi, kemik iliği hücreleri, anterler (polen ana hücreleri) gibi. Sperm yuvaları (spermatositler) vb.
(2) Sabit. Malzeme fiksasyonu ihtiyaca göre belirlenebilir ve numune hemen sıkıştırılıp gözlemlenmelidir. Ayrı bir fiksasyon tedavisi (boyama ile eşzamanlı) yapılmasına gerek yoktur; Malzeme numune alındıktan hemen sonra incelenmezse bir fiksatif (genellikle asetik asit alkol fiksatifi) ile sabitlenebilir. 2-24 saat (malzemeye bağlı olarak) sabitlendikten sonra %95 etanol ile durulayın ve daha sonra kullanmak üzere %70 etanol içerisinde saklayın.
(3) Ayırma. Hücreler tarafından kolayca dağılmayan materyaller, 6-20 dakika boyunca bir hidroliz ayırma çözeltisiyle (İN HC1 veya hidroklorik asit semeni gibi) işlemden geçirilmelidir. Ayrışmadan sonra boyamadan önce su ile durulanmalıdır.
(4) Boyama. Birçok boya türü vardır. Kromozomlar genellikle asetik asit macenta boyama çözeltisiyle boyanır.
(5) Tablete basın. Malzemeyi bir cam slayt üzerine yerleştirin, bir damla su veya boya solüsyonu ekleyin, slaytı bir kapakla kapatın ve baş parmağınızla hafifçe bastırın.
(6) Gözlemleyin. Sıkıştırıldıktan sonra mikroskop altında gözlemlenebilir.
