Mikroskopun temel yapısı ve yağlı merceğin nasıl çalıştığı
Modern genel optik mikroskoplar, görüntüyü büyütmek için bir göz merceği ve bir objektif mercek olmak üzere iki mercekten oluşan bir sistem kullanır ve genellikle bileşik mikroskoplar olarak anılırlar. İki ana bölümden oluşurlar: mekanik cihaz ve optik sistem. Mikroskobun optik sisteminde, objektif merceğin performansı en kritik olanıdır ve bu, mikroskobun çözünürlüğünü doğrudan etkiler. Genel optik mikroskoplarda yaygın olarak kullanılan çeşitli objektif lens türleri arasında, yağ merceği en büyük büyütme oranına sahiptir ve mikrobiyolojik araştırmalar için en önemlisidir. Diğer objektif lenslerle karşılaştırıldığında, yağlı lenslerin kullanımı daha özeldir; slayt ile lens arasına bir damla ayna yağı eklemeniz gerekir; bunun başlıca nedeni aşağıdaki iki husustur:
1. Yağ aynası aydınlatmasının parlaklığını 100 Χ'ye kadar artırın, bu kadar büyük bir merceğin büyütülmesi, odak uzaklığı çok kısa, çap çok küçük, ancak gerekli ışık yoğunluğu en büyüğüdür. Farklı ortam yoğunluğu nedeniyle (slayttan havaya ve ardından merceğe) slaydın örneklerinin ışık boyunca taşınmasından dolayı ışığın bir kısmı kırılma veya toplam yansıma nedeniyle merceğe giremez, bu da sonuç olarak ortaya çıkar. Yağlı ayna kullanımında ışık azlığından dolayı nesne görüntüsü net çıkmayacaktır. Bu nedenle ışığın kayıpla geçmemesi için yağlı ayna kullanımında yağlı ayna ile camın kırılma indisi (n=1.55) olan kızak arasına yağlı aynaya benzer şekilde ilave edilmelidir. (genellikle sedir yağıyla birlikte, kırılma indisi n=1.52).
2. Mikroskobun çözünürlüğünü artırın Mikroskobun çözünürlüğü veya çözme gücü, mikroskobun iki nokta arasındaki minimum mesafeyi tanıma yeteneğidir. Fiziksel açıdan bakıldığında, optik mikroskobun çözünürlüğü girişim olgusu ve kullanılan objektif merceğin performansı ile sınırlıdır. Çözme gücü D şu şekilde ifade edilebilir: D=λ/2N.A, burada λ=ışık dalgasının dalga boyu; Yok Objektif merceğin=sayısal açıklık değeri. Optik mikroskopta ışık kaynağının görünür ışığın dalga boyu aralığının (0.4 - 0.7 μ m) ötesinde olması mümkün değildir, sayısal açıklık değeri ise ayna ağız açısının objektif merceğine ve kırılma derecesine bağlıdır. slayt ile mercek arasındaki ortamın indeksi şu şekilde ifade edilebilir: NA=n × sin ki burada ışığın maksimum geliş açısının yarısıdır. Bu, objektif merceğin çapına ve odak uzaklığına bağlıdır; genel olarak pratikte maksimum yalnızca 120 O'ya ve ortamın kırılma indisi için n'ye ulaşabilir. Sedir yağının kırılma indisi (1.52) havanın ve suyun kırılma indisinden (sırasıyla 1.0 ve 1.33) daha yüksek olduğundan, sedir yağı bir mercek olarak ortamlar arasında kayar. Yağlı ayna, sayısal açıklık değerini (NA genellikle 1.2-1.4'tedir) düşük büyütmeli merceklerden daha yüksek, kuru ayna gibi yüksek büyütmeli merceklerden (NA 1'den düşüktür) elde edebilir. 0). Görünür ışığın ortalama dalga boyu 0,55 μm ise, sayısal açıklığı 0,65 olan yüksek büyütmeli bir mercek yalnızca 0'den az olmayan bir mesafedeki nesneleri ayırt edebilir. 4 μm, yağlı aynanın çözünürlüğü ise yaklaşık 0,2 μm olabilir.
