Multifoton lazer tarama mikroskobunun avantajları ve dezavantajları
Çoklu Fotonlu Lazer Taramalı Mikroskobu, 3D görüntülemede daha doğru optik kesit alma yetenekleri sağlayan, lazer taramalı mikroskopi teknolojisine dayanan deneysel bir yöntemdir. Multifoton floresans uyarma yöntemi, aktif örneklerin minimum düzeyde öldürülmesiyle örneklerin yüksek çözünürlüklü floresan görüntülerini elde etmek için kırmızı veya yakın kızılötesi ışığın uzun dalga boylarını kullanır; bu, canlı hücrelerin, özellikle de beyin dilimleri, embriyolar gibi kalın canlı dokuların görüntülenmesi için uygun hale getirir. bütün organlar ve hatta bütün organizmalar.
Avantajları aşağıdaki gibidir:
1, kırmızı ışık veya kızılötesi ışık uyarımı kullanımı, ışık saçılımı küçüktür (küçük parçacıkların saçılması ve ters oranın dördüncü gücünün dalga boyu).
2, bir iğne deliği gerektirmez, görüntüleme kesitinden daha fazla dağınık foton toplayabilir.
Şekil 3'te, iğne deliği, odak dışı bölge veya odak alanı tarafından yayılan dağınık fotonlar arasında ayrım yapamaz, derin görüntülemede çoklu foton sinyal-gürültü oranı iyidir.
4, numune kolayca emilmeden ve zayıflatılmadan önce odak düzlemine ulaşmak için ışında kullanılan ultraviyole veya görünür ışığın tek foton uyarılması, derin uyarılması kolay değildir.
5, biyolojik mikroskop gözleminde, * İlk husus organizmanın aktif durumuna zarar vermemek, su, iyon konsantrasyonu, oksijen ve besin dolaşımını sürdürmektir. Işık gözlemlerinde hem termal hem de foton enerjisinin, ışınım miktarı yani ışık enerjisine zarar vermeden hücrede kalması gerekir.
6, çoklu foton mikroskobunun da birçok avantajı vardır. Üç boyutlu çözünürlük, derinlik ihlali, saçılma verimliliği, arka plan ışığı, sinyal-gürültü oranı, kontrol vb. gibi önceki lazer mikroskopların sahip olmadığı veya karşılaştırılamaz özelliklere sahip olduğu vardır.
Çok fotonlu eş odaklı lazer tarama mikroskobu, çeşitli araştırma ve uygulama alanlarına genişletildi. Numunelerin doğal hallerinde üç boyutlu, tahribatsız olarak gözlemlenmesi yeteneğine sahiptir ve sistemin çözünürlüğünü ve sinyal-gürültü oranını geliştirebilir. Çoklu foton uyarımı sonrasında malzeme özelliklerinin değişimini kullanarak, yüksek uygulama değerine sahip olan üç boyutlu yükseklik veri depolama ve herhangi bir yönde üç boyutlu mikro imalat elde etmek de mümkündür. Çok fotonlu eş odaklı mikroskopi ile ilgili makine, malzeme, lazer teknolojisi ve diğer teknolojilerin daha da gelişmesiyle, çok fotonlu eş odaklı lazer tarama mikroskobunun daha fazla gelişme ve daha geniş uygulama olacağına inanılabilir.
Dezavantajları aşağıdaki gibidir:
1, yalnızca floresans görüntüleme.
Şekil 2'de gösterildiği gibi, numune pigmentler gibi uyarma ışığını emebilen kromoforlar içeriyorsa numune termal olarak hasar görebilir.
Şekil 3'te çözünürlük biraz azalır, ancak eş odaklı açıklığın eşzamanlı kullanımıyla geliştirilebilir, ancak sinyal kaybı olacaktır.
4. Pahalı ultra hızlı lazerlerin sınırlılığı nedeniyle multifoton taramalı mikroskopinin maliyeti yüksektir.
