Filmlerin optik ve elektron mikroskobu için numune hazırlama yöntemleri
Mikrofilm yöntemi genel olarak dört kategoriyi içerir: kesit yöntemi, genel kapatma yöntemi, kaplama yöntemi ve presleme yöntemi.
①Dilim yöntemi. Optik mikroskop dilim kalınlığı 2 ila 25 mikron arasında, genel bitki ve hayvan materyallerinde, dilimin yaklaşık 10 mikron kalınlığında olması uygundur. Kesitleme yöntemi farklı gömme ajanlarına göre değişir. Yaygın olarak kullanılanlar parafin kesit yöntemi, pamuklu tutkal kesit yöntemi, dondurulmuş kesit yöntemi ve glikol metakrilat yöntemidir (GMA yöntemi olarak anılır). Parafin kesit alma yöntemi sabitleme, gömme, kesit alma, boyama, dehidrasyon ve mühürleme adımlarını içerir. Önemli olan, biyomateryali parafin mumuna gömmek ve mum bloğuna batırılmış biyomateryali ideal ince dilimler halinde kesmek için parafin mumunu destek olarak kullanmaktır. Operasyon süreci şu şekildedir: sabitleme → suyla yıkama → adım adım düşükten yüksek konsantrasyona alkol dehidrasyonu → ksilen şeffaflığı → balmumu daldırma → gömme → kesit alma → yama → ksilen mum giderme → yüksekten düşük konsantrasyona adım adım alkol muamelesi ve son olarak suya geçiş → boyama → adım adım düşük konsantrasyondan yüksek konsantrasyonlu alkol dehidrasyonuna → ksilen şeffaflığı → reçine yapıştırıcıyla kapatma. İlgili temel adımlar her türlü film yapım tekniğinde aynıdır.
② Entegre sızdırmazlık yöntemi. Bütün monte film yönteminin tek hücreleri, küçük organizmaları veya dağınık organları için kullanılır. Bu yöntem aynı zamanda çeşitli sabitleme, boyama, dehidrasyon, şeffaflık ve sızdırmazlık adımlarını da gerektirir. Bu yöntem, dantel kanatlarının ve böceklerin ağız parçalarının hazırlanmasında kullanılır.
Smear yöntemi. Kolayca dağılmış bir biyolojik numunenin bir slayt üzerine kaplandığı bir hazırlama yöntemi. Kan yayması buna bir örnektir.
④Presleme yöntemi. Slayt üzerinde doğal, kolayca dağılan dokular veya hayvan spermatositleri, kök ucu hücreleri vb. gibi tedaviden sonra kolayca dağılan dokular artı bir lamel ve ardından dokuları kuvvetli bir şekilde ezerek hücrelerin veya hücre içi yapıların bir katmana yayılmasını sağlar. çekim yöntemleri. Pres yöntemi genellikle macenta asetat, liken kırmızısı ve karbolik asit kırmızısı ile boyanmış kromozomları gözlemlemek için kullanılır.
