Konfokal Mikroskobun Neden Gerekli Olduğuna Giriş
1. Optik mikroskop, büyük öncüllerimizin çabaları ve iyileştirmeleri sayesinde mükemmelleştirilmiştir. Aslında geleneksel mikroskoplar bize basit ve hızlı bir şekilde güzel mikroskobik görüntüler sağlayabilir. Ancak, bu neredeyse mükemmel mikroskop dünyasına devrim niteliğinde bir yenilik getiren bir olay meydana geldi: "lazer taramalı eş odaklı mikroskobun" icadı. Bu yeni mikroskobun özelliği, yalnızca odağın yoğunlaştığı yüzeydeki görüntü bilgisini çıkaran bir optik sistemin kullanılmasıdır. Odağı değiştirerek ve elde edilen bilgileri görüntü belleğine geri yükleyerek, tam 3 boyutlu bilgileri içeren canlı bir görüntü elde edilebilir. Bu yöntem sayesinde yüzey şekli hakkında geleneksel mikroskoplarla doğrulanamayan bilgiler kolaylıkla elde edilebilmektedir. Ek olarak, tipik optik mikroskoplar için "çözünürlüğün iyileştirilmesi" ve "odak derinliğinin derinleştirilmesi", özellikle yüksek büyütmede çelişkili koşullardır. Ancak eş odaklı mikroskoplar için bu sorun kolaylıkla çözülebilir.
Eş odaklı optik sistem numuneye noktasal aydınlatma sağlarken, yansıyan ışık da bir nokta sensörü tarafından alınır. Numune odak konumuna yerleştirildiğinde yansıyan ışığın neredeyse tamamı fotoreseptöre ulaşabilir. Örnek odak noktasından saptığında yansıyan ışık fotoreseptöre ulaşamaz. Yani konfokal optik sistemde sadece odak noktasına denk gelen görüntü çıkacak, spot ve gereksiz dağınık ışık engellenecektir.
Eş odaklı optik sistemde numuneye noktasal aydınlatma uygulanır ve yansıyan ışık da bir nokta sensörü tarafından alınır. Bu nedenle noktasal ışık kaynaklarına ihtiyaç duyulmaktadır. Lazer çok noktasal bir ışık kaynağıdır. Çoğu durumda, konfokal mikroskopinin ışık kaynağı bir lazer ışık kaynağıdır. Ayrıca lazerlerin tek renkliliği, yönlülüğü ve mükemmel ışın şekli de bunların yaygın olarak benimsenmesinin önemli nedenleridir.
