Lazer taramalı eş odaklı mikroskobun lazer yoğunluğu nasıl ayarlanır?
Lazer yoğunluğu için iki ayarlama faktörü vardır: güç kontrol düğmesi ve akustik-optik ayarlanabilir filtre (AOTF)
1. Güç kontrol düğmesi: Genellikle maksimum değerin %30'una ayarlanır. Çıkışın arttırılması lazerin ömrünü kısaltacak ve lazer gürültüsü üretecektir. En iyi yoğunluğu elde etmek için öncelikle AOTF, PMT vb. ayarlanmalıdır.
2. Acousto optik ayarlanabilir filtre: uyarım ışık ışınını ve yoğunluğunu kontrol eder ve lazeri açıp kapatabilir veya milisaniyeler içinde %0-100 arasında ayarlayabilir. Bu, her görüntü noktası için farklı lazer ışınlarının kullanılmasına ve gerekli yoğunluğun seçilmesine olanak sağlar.
Çalışma prensibi: Çeşitli ortamlarda yayılan ses dalgalarının Bragg kırınım etkisini, yayılma ortamındaki olay Bragg kırınımı üzerinde kullanır. Belirli bir RF sinyali frekansı girildiğinde, AOTF gelen polikromatik ışığı kırar ve girişin dalga boyuna göre monokromatik ışığı seçer. Monokromatik ışığın dalga boyu, RF frekansı f ile bire-bire-bire karşılık gelir. Elektrik sinyali ayarlandığı sürece çıkış dalga boyu hızlı ve rastgele değiştirilebilir. AOTF, lazer yoğunluğunun sürekli olarak ayarlanmasını sağlar ve yerel uyarım ve taramayı gerçekleştiren, hızlı dalga boyu değişimini (mikrosaniye seviyesi) gerçekleştiren hızlı ayarlama fonksiyonuna sahiptir. Lazer konfokal mikroskopide fotomultiplier tüpler lazerin yoğunluğunu artıramaz ancak görüntüleme sonrası ışığın yoğunluğunu ayarlayabilir. Bu nedenle fotoçoğaltıcı tüpün voltajı ayarlanarak görüntünün parlaklığı ayarlanabilir. Ayrıca odak iğne deliğinin boyutu foton miktarını etkiler ve ayrıca görüntünün parlaklığını da ayarlayabilir. Fotoçoğaltıcı tüp, ultraviyole, görünür ve yakın{10}kızılötesi ışığa son derece duyarlı olan özel bir vakum tüpüdür. Gelen zayıf ışık sinyalini 108 kat artırarak ışık sinyalinin ölçülmesini sağlar.
