Floresan mikroskoplar optik yollarına göre iki tipe ayrılır:
1. Transmisyon floresans mikroskobu: Uyarma ışık kaynağı, bir yoğunlaştırıcı lens aracılığıyla numune materyalinden geçerek floresansı uyarmak için kullanılır. Yaygın olarak kullanılan karanlık alan yoğunlaştırıcılar da kullanılabilir ve sıradan yoğunlaştırıcılar, uyarım ışığını numune üzerine yönlendirmek ve yan loblamak üzere reflektörü ayarlamak için kullanılabilir. Bu nispeten eski-moda bir floresan mikroskobu. Avantajı, düşük büyütmede güçlü floresans sağlamasıdır, ancak dezavantajı, artan büyütmeyle floresansının azalmasıdır. Bu nedenle daha büyük numune malzemelerinin gözlemlenmesi daha iyidir.
2. Düşen ışıklı floresan mikroskobu, modern zamanlarda geliştirilen yeni bir floresan mikroskobu türüdür. Yukarıdakilerden farklı olarak, uyarım ışığı, aydınlatma yoğunlaştırıcısı ve floresans toplamak için kullanılan objektif merceği ile aynı objektif merceğini kullanarak objektif merceğinden aşağıya doğru numunenin yüzeyine düşer. Işık uranyumundan 45 derece uzakta olan optik yola çift renkli ışın ayırıcının eklenmesi gerekiyor. Açı, uyarma ışığı objektif merceğe yansıtılır ve numuneye odaklanır. Numune tarafından üretilen floresansın yanı sıra objektif lensin ve kapak camının yüzeyinden yansıyan uyarım ışığı, objektif merceğe girer ve uyarı ışığını ve floresanı ayırarak çift renkli ışın ayırıcıya geri döner. Artık uyarım ışığı daha sonra engelleme filtresi tarafından emilir. Farklı uyarma filtreleri/çift renkli ışın ayırıcılar/engelleme filtreleri kombinasyonları kullanılırsa, farklı floresan reaksiyon ürünlerinin ihtiyaçlarını karşılayabilirler. Bu floresans mikroskobunun avantajları, düzgün alan aydınlatması, net görüntüleme ve daha büyük büyütme ile daha güçlü floresanstır.
(2) Floresan mikroskobunu kullanma talimatları
1. Işık kaynağını açın. Ultra-yüksek basınçlı cıva lambasının maksimum parlaklığına ulaşması için birkaç dakika önceden ısıtılması gerekir.
2. Transmisyon floresan mikroskobu, lamba kaynağı ile yoğunlaştırıcı arasına gerekli uyarma filtresinin ve objektif merceğin arkasına karşılık gelen engelleme filtresinin takılmasını gerektirir. Düşen ışık floresan mikroskobunun gerekli uyarma filtresini/çift renkli ışın ayırıcıyı/engelleme filtre bloğunu optik yolun yuvasına yerleştirmesi gerekir.
3. Düşük-güçlü bir mikroskopla gözlemleyin ve ışık kaynağının merkezini, farklı tipteki floresans mikroskoplarının ayarlama cihazına göre, tüm aydınlatma noktasının merkezinde yer alacak şekilde ayarlayın.
4. Örneği yerleştirin ve gözlem için odaklayın. Kullanım sırasında dikkat edilmelidir: Göze zarar vermemek için filtreyi takmadan önce doğrudan gözünüzle gözlemlemeyin; Numuneleri bir yağ mikroskobu ile incelerken, özel bir floresan olmayan yağ mikroskobu kullanılmalıdır; Yüksek-basınçlı cıva lambası kapatıldıktan sonra hemen tekrar açılamaz. Yeniden başlatılması 5 dakika sürer, aksi takdirde kararsız hale gelir ve cıvalı lambanın ömrünü etkiler.
(3) Mavi mor ışık filtresi kullanan bir öğretim platformunda floresan mikroskobu altında gözlemlendiğinde, %0,01 akridin turuncusu floresan boyayla boyanmış hücreler görülebilir. Çekirdek ve sitoplazma, iki farklı renkte floresans (koyu yeşil ve turuncu kırmızı) üretmek üzere uyarılır.
