Bakteriyel gözlem için ne tür bir mikroskop kullanılmalıdır?
Optik mikroskop, nesneleri büyütmek ve gözlemlemek için hassas bir araçtır. Farklı optik mikroskoplar, farklı numune türlerini gözlemleyebilir. Mikrobiyal araştırma, bitki araştırması, hayvan araştırması ve diğer endüstrilerdeki kullanıcıların bakteri boyutunu görmeleri ve ardından bunu gözlemlemeleri gerekir. Örnekleri sınıflandırırken ne tür bir mikroskop kullanılması gerektiği bu makalede ayrıntılı olarak incelenmiştir.
Bu sorunun cevabı bakteri hücre boyutu, insan gözü ve mikroskop çözünürlüğü açısından tartışılabilir.
1. Bakterilerin boyutları genellikle mikrondur. Örnek olarak Escherichia coli'yi ele alalım: uzunluk yaklaşık 1um ve genişlik yaklaşık 0.5um'dur.
2. Çözünürlük, net bir şekilde ayırt edilebilen iki nesne noktası arasındaki en küçük mesafeyi ifade eder.
Bir mikroskobun çözünürlüğü, mikroskop büyütüldükten ve görüntülendikten sonra açıkça ayırt edilebilen iki nesne noktası arasındaki minimum mesafeyi ifade eder.
Aletin çözünürlüğü, aletin ölçülen nesnenin ince yapısı hakkında bilgi sağlama yeteneğini ifade eder. Daha yüksek çözünürlükler daha ayrıntılı bilgi sağlar. Büyütme sınırını aşan büyütme, geçersiz büyütme olarak adlandırılır ve geçersiz büyütme, ince yapı hakkında daha fazla bilgi sağlayamaz.
3. İnsan gözünün çözünürlüğü 0.1 mm'dir, yani yeterli ışık ve 1 fitlik mesafe koşullarında insan gözünün ayırt edebileceği iki nokta arasındaki minimum mesafe {{4} }.1mm.
4. Özetlemek gerekirse: Bakterilerin varlığını görmek için büyütme en az: 0,1 mm ÷ 0,5um=1000 ÷ 5=200 kez olmalıdır. Ancak bu büyütmede görülen bakteri (Escherichia coli) sadece küçük bir noktadır ve daha ince yapısal bilgilerinin görülebilmesi için mikroskobun büyütmesinin artırılması gerekir.
5. Sıradan optik mikroskopların çözünürlüğü, genellikle sıradan optik mikroskopların büyütme sınırı olan 1000 kattan fazla olmayan görünür ışığın dalga boyu (390~770nm) ile sınırlıdır. 1000 kattan fazla büyütme, geçersiz büyütme aralığına ait daha ayrıntılı yapısal bilgi sağlayamaz.
6. Elektron mikroskobunun büyütmesi 800,000 katına ulaşabilir. Temel ilke, yüksek voltaj yoluyla kısa dalga boyunda elektron dalgaları üreten sıradan optik mikroskopla aynıdır.
400x büyütmede (10x, 40x), bakterileri zar zor görebilirsiniz, ancak bunlar küçük noktalar gibi yalnızca bir iğne ucu boyutundadır. Genel olarak, gözlem için hala 1000 kat (10x, 100x) büyütüyoruz. Bu sırada bakteri görünümü hala net bir şekilde görülebilmekte ve özel boyamadan sonra flagella net bir şekilde görülebilmektedir. 1000 kat büyütmek için yağlı mercek kullanmanız gerekir. Yağlı mercek denilen şey, objektif merceği ile kapak camı arasına bir damla sedir yağı damlatmaktır. Sedir yağının ışığı kırma indeksi havanınkinden daha yüksektir, bu nedenle daha büyük bir büyütme kullanılabilir.
10x, 40x, merceğin 10x, 40x büyütüldüğü anlamına gelir. Merceğin büyütmesi, mikroskobun toplam büyütmesini elde etmek için objektifin büyütmesiyle çarpılır. Ortaokullarda kullanılan mikroskopların okülerleri ve objektif lensleri değiştirilebilir olup, okülerler genellikle 5x ve 10x'tir. Küçük bir mikroskobun okülerleri genellikle sadece 10x'tir ve Escherichia coli (E.coli), Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis ve Bacillus megaterium (sporları görüntülemek için) görmüştür.
