Karanlık alan mikroskobu nedir? Bir hücre ne kadar küçük görülebilir?
Karanlık alan mikroskobu, ultramikroskop olarak da adlandırılan bir tür optik mikroskoptur. Karanlık alan mikroskobunun yoğunlaştırıcısının ortasında, aydınlatma ışığının doğrudan insan merceğine girmemesi için bir ışık kalkanı bulunur. Yalnızca numune tarafından yansıtılan ve kırılan ışığın objektif merceğe girmesine izin verilir. Bu nedenle görüş alanının arka planı siyah, nesnelerin kenarları ise parlaktır. ile ilgili. Bu tür bir mikroskop, 4~200 nm kadar küçük parçacıkları görebilir ve çözünürlük, sıradan mikroskoplardan 50 kat daha yüksek olabilir.
prensip
Karanlık alan mikroskobu, Tyndall optik etkisi ilkesi kullanılarak sıradan optik mikroskobun yapısına göre modifiye edilmiştir. Karanlık alan yoğunlaştırıcıları, ışık kaynağının merkezi ışınının engellenmesine olanak tanır. Aşağıdan yukarıya doğru numunenin içinden objektif merceğe girmek mümkün değildir. Sonuç olarak, ışık yolunu değiştirir ve gözlenen numunenin üzerine eğik bir şekilde ışınlanır. Numune ışıkla karşılaştığında yansıtılır veya dağılır. Dağınık ışık objektif merceğe atılır, böylece tüm görüş alanı karanlık olur.
Karanlık alan mikroskobunun temel prensibi Tyndall etkisidir. Bir ışık huzmesi karanlık bir odadan geçtiğinde, gelen ışığa dik yönden havada parlak bir toz "yolu" gözlemlenebilir. Bu fenomen Tyndall etkisidir. Karanlık alan mikroskobu, sıradan bir optik mikroskopta karanlık alan yoğunlaştırıcısı ile değiştirildikten sonra, yoğunlaştırıcının iç parabolik yapısının tıkanması nedeniyle, incelenecek nesnenin yüzeyine yayılan ışık doğrudan objektife giremez. mercek ve mercek ve yalnızca dağınık ışık geçebilir, dolayısıyla görüş alanı azalır. karanlık. Karanlık alan mikroskobu doğrudan gözlem sistemine şeffaf ışık yaymadığı için nesne olmadığında görüş alanı karanlık olur ve herhangi bir nesneyi gözlemlemek imkansızdır; Bir nesne olduğunda, nesnenin geri kırdığı ışık ve saçılan ışık, karanlık arka planda parlak bir şekilde görülebilir. . Karanlık bir alanda bir nesneyi gözlemlerken, aydınlatma ışığının çoğu kırılır. Nesnenin (örneğin) konumu, yapısı ve kalınlığı nedeniyle ışığın saçılması ve kırılması büyük ölçüde değişir.
Yapı ve modifikasyon
Karanlık alan mikroskobunun temel yapısı sıradan bir mikroskop optik seti artı bir ışık bariyerinden oluşur. Sıradan bir mikroskop, yoğunlaştırıcının çıkarılabilir olması ve braketin çapının bir karanlık alan yoğunlaştırıcısının kurulumu için uygun olması koşuluyla, karanlık alan mikroskobuna dönüştürülebilir. Karanlık alan yoğunlaştırıcısı olmadığında, merkezi bir ışık kalkanı oluşturmak için kalın siyah kağıt kullanabilir ve karanlık alan etkisini elde etmek için bunu sıradan bir mikroskobun yoğunlaştırıcısının altındaki filtre çerçevesine yerleştirebilirsiniz. Işık kalkanı, ışık kaynağının ortasındaki ışığı engellemek ve böylece ışığın yalnızca çevreden numuneye girebilmesini sağlamak için kullanılır. Boyut, açıklık boyutuyla hemen hemen aynıdır. Farklı büyütmeler farklı açıklıklar kullanır, dolayısıyla farklı ışık bloklarının yapılması gerekir.
Pratik uygulama
Karanlık alan mikroskobu genellikle lekelenmemiş şeffaf numuneleri gözlemlemek için kullanılır. Bu örneklerin kırılma indisi çevredeki ortama benzer olduğundan, sıradan parlak alan koşullarında net bir şekilde görülmeleri zordur. Bu nedenle numunenin kendisi ile arka plan arasındaki kontrastı iyileştirmek için karanlık alan koşulları kullanılır. Bu tür bir mikroskop 4~200 nm kadar küçük parçacıkları görebilir. Sadece cismin varlığını, hareketini ve yüzey özelliklerini görebilir ancak cismin ince yapısını ayırt edemez. Klinik olarak, soluk spiroketleri incelemek için karanlık alan mikroskobu yaygın olarak kullanılır. Bu, erken frengi tanısı için büyük önem taşıyan bir patojen testidir.
