Floresan mikroskobunun prensibi ve yapısal özellikleri
Floresan mikroskobu, uyarma ışığı olarak bir renk filtreleme sisteminden belirli bir dalga boyunda ışık (ultraviyole ışık 3650 inç veya mor mavi ışık 4200 inç gibi) yaymak için yüksek ışık verimliliğine sahip bir nokta kullanır ve numunedeki flüoresan maddeleri çeşitli yaymak için uyarır. floresan renkleri. Daha sonra objektif merceğin ve göz merceğinin büyütülmesiyle gözlenir. Bu şekilde, güçlü bir arka plana karşı floresan çok zayıf olduğunda bile yüksek hassasiyetle fark edilmesi kolaydır. Esas olarak hücre yapısı ve işlevinin yanı sıra kimyasal bileşimin incelenmesi için kullanılır. Floresan mikroskobunun temel yapısı, sıradan bir optik mikroskop ile floresan ışık kaynağı, uyarma filtresi, dikroik ışın ayırıcı ve bloke edici filtre gibi aksesuarlardan oluşur. Floresan ışık kaynakları genellikle çeşitli dalga boylarında ışık yayan ultra yüksek basınçlı cıva lambaları (50-200W) kullanır. Bununla birlikte, her flüoresan madde, en güçlü flüoresansı üreten bir uyarma ışığı dalga boyuna sahiptir, bu nedenle uyarma filtrelerinin (tipik olarak ultraviyole, mor, mavi ve yeşil uyarma filtreleri) yalnızca belirli bir dalga boyunda uyarma ışığının nüfuz etmesine ve ışınlamasına izin vermek için eklenmesi gerekir. numune, diğer tüm ışığı emerken. Uyarıcı ışıkla ışınlandıktan sonra, her madde çok kısa bir süre içinde ışınlama dalga boyundan daha uzun görünür floresans yayar. Floresan özgüllüğe sahiptir ve genellikle uyarma ışığından daha zayıftır. Spesifik flüoresanı gözlemlemek için, objektif merceğin arkasına engelleme (veya bastırma) eklemek ve bunu kombinasyon halinde kullanmak gerekir.
Floresan mikroskobu ve sıradan mikroskop arasındaki fark
1. Aydınlatma yöntemi genellikle, ışık kaynağının bir objektif mercek vasıtasıyla numune üzerine yansıtıldığı, düşen bir ışın tipidir;
2. Işık kaynağı, sıradan mikroskoplardan daha kısa bir dalga boyuna ve daha yüksek çözünürlüğe sahip ultraviyole ışıktır;
3. İki özel filtre vardır, ışık kaynağının önündeki filtre görünür ışığı filtrelemek için kullanılır ve mercek ile objektif merceği arasındaki filtre insan gözünü korumak için ultraviyole ışınları filtrelemek için kullanılır.
Floresan mikroskobu aynı zamanda bir tür optik mikroskopidir, temel fark farklı uyarma dalga boylarıdır. Bu, flüoresan mikroskopi ile sıradan optik mikroskopi arasındaki yapı ve kullanım farklılıklarını belirler.
Floresan mikroskobu, immünofloresan sitokimyası için temel bir araçtır. Işık kaynağı, filtre plaka sistemi ve optik sistem gibi ana bileşenlerden oluşur. Numuneyi flüoresan yayması için uyarmak için belirli bir dalga boyunda ışık kullanır ve numunenin flüoresan görüntüsünü gözlemlemek için onu bir objektif lens ve oküler sistemi aracılığıyla büyütür.
