Bir floresan mikroskobunun yapısı ve ana bileşenleri
Floresan mikroskopi, immünofloresan sitokimyada önemli bir araçtır. Işık kaynağı, filtre plaka sistemi ve optik sistem gibi ana bileşenlerden oluşur. Numuneyi floresan yayması için uyarmak için belirli bir dalga boyunda ışık kullanmak ve objektif lensi ve oküler sistemini güçlendirerek numunenin floresan görüntüsünü gözlemlemek içindir.
Bir floresan mikroskobunun yapısı ve ana bileşenleri
(1) Işık kaynağı
Günümüzde 200W ultra yüksek basınçlı cıvalı lambalar genellikle ışık kaynağı olarak kullanılmaktadır. Ortası küresel bir şekle sahip kuvars camdan yapılmıştır ve içine belirli bir miktar cıva doldurulmuştur. Çalışma sırasında, iki elektrot arasındaki boşalma cıvanın buharlaşmasına neden olur ve toptaki hava basıncı hızla yükselir. Cıva tamamen buharlaştığında, 50-70 standart atmosfer basıncına ulaşabilir ve bu işlem genellikle yaklaşık 5-15 dakika sürer. Ultra yüksek basınçlı cıva lambasının lüminesansı, elektrotlar arasındaki deşarj ile cıva moleküllerinin sürekli ayrışması ve indirgenmesi sırasında ışık miktarının emisyonunun sonucudur. Çeşitli floresan maddeleri harekete geçirmek için yeterli olan güçlü ultraviyole ve mavi-mor ışık yayar, bu nedenle floresan mikroskopisinde yaygın olarak kullanılır.
Ultra yüksek basınçlı cıvalı lambalar da çok fazla ısı yayar. Bu nedenle, lamba evi iyi ısı yayma koşullarına sahip olmalı ve çalışma ortamı sıcaklığı çok yüksek olmamalıdır.
Yeni ultra yüksek basınçlı cıva lambası, kullanım başlangıcında yüksek voltaj olmadan ateşlenebilir. Belirli bir kullanım süresinden sonra yüksek voltajda (yaklaşık 15000V) çalıştırılması gerekir. Başladıktan sonra, bakım çalışma voltajı genellikle 50-60V'dir ve çalışma akımı yaklaşık 4A'dır. 200W ultra yüksek basınçlı cıva lambasının ortalama ömrü, her seferinde 2 saat kullanılması halinde yaklaşık 200 saattir. Çalışma süresi ne kadar kısaysa kullanım ömrü de o kadar kısadır. Sadece 20 dakika kullanılırsa kullanım ömrü yüzde 50 kısalıyor. Bu nedenle, kullanırken başlatma sayısını en aza indirin. Ampulün kullanımı sırasında aydınlatma etkinliği giderek azalır. Işık söndükten sonra, yeniden başlatmadan önce soğumasını bekleyin. Eksik cıva buharlaşması nedeniyle elektroda zarar vermemek için ampulü ateşledikten hemen sonra kapatmayın. Genelde 15 dakika beklemesi gerekiyor. Ultra yüksek basınçlı cıva lambasının yüksek basıncı ve güçlü ultraviyole ışınları nedeniyle, gözlere zarar vermemek ve bir patlama durumunda çalışmasına neden olmamak için ampul tutuşmadan önce lamba odasına yerleştirilmelidir. .
Ultra yüksek basınçlı cıva lambasının (100W veya 200W) ışık kaynağı devresi ve trafo, balast ve çalıştırma dahil olmak üzere birçok parça. Lamba haznesinde ampulün ışık merkezini ayarlamak için bir sistem vardır. Ampul ampulünün arkasına alüminyum kaplamalı içbükey bir reflektör ve ön tarafına bir ışık toplama merceği yerleştirilmiştir.
Yerli ultra yüksek basınçlı cıva lambası GCQ-200 iyi bir performansa sahiptir ve HBO-200 gibi ithal ampullerin yerini alabilir. Ortalama kullanım ömrü 200 saatten fazladır ve fiyatı nispeten düşüktür.
Ülkemde geliştirilen basit ve taşınabilir, yüksek renk sıcaklığına sahip bromin tungsten floresan ışık kaynağı cihazı, küçük boyutlu, hafif, düşük güçlü, AC ve DC çift kullanımlı (DC güç kaynağı ile), taşıması kolay, kullanımı kolay ve yaygınlaştırıldı ve uygulandı.
(2) Renk filtre sistemi
Renk filtre sistemi, bir uyarma filtre plakasından ve bir presleme filtre plakasından oluşan floresan mikroskobunun önemli bir parçasıdır. Filtre plakası modeli ve her üreticinin adı genellikle tek tip değildir. Filtre plakaları genellikle temel renkten sonra adlandırılır, öndeki harfler rengi, arkadaki harfler camı ve sayılar modelin özelliklerini temsil eder. olimpos mikroskobu
(3) Objektif merceği
Çeşitli objektif lensler kullanılabilir, ancak akromatik objektif lensler otofloresanslarının minimum olması ve ışık geçirgenlik özelliklerinin (dalga boyu aralığı) floresans için uygun olması nedeniyle kullanılır. Mikroskop görüş alanındaki görüntünün flüoresan parlaklığı, objektif merceğin açıklık oranının karesiyle orantılı ve büyütmesiyle ters orantılı olduğundan, flüoresan görüntünün parlaklığını iyileştirmek için, büyük bir objektif merceği diyafram oranı kullanılmalıdır. Özellikle yüksek büyütmede etkisi çok barizdir. Bu nedenle, yetersiz flüoresanslı numuneler için, mümkün olduğunca düşük bir göz merceğiyle (4×, 5×, 6,3×, vb.) geniş açıklık oranına sahip bir objektif lens kullanılmalıdır.
(4) Ayna
Reflektörün yansıtıcı tabakası genellikle alüminyum kaplıdır, çünkü alüminyum ultraviyole ışığın ve görünür ışığın mavi-mor bölgesinde daha az soğurur ve yansıma yüzde 90'dan fazladır, gümüşün yansıması ise yalnızca yüzde 70'tir. Genellikle düz bir reflektör kullanılır.
(5) Kondansatör
Floresan mikroskobu için tasarlanmış kondansatörler kuvars camdan veya diğer UV geçirgen camdan yapılmıştır. İki tür açık alan kondansatörü ve karanlık alan kondansatörü vardır. Faz kontrastlı floresan yoğunlaştırıcılar da vardır.
(6) Epi-ışık cihazı
Yeni tip epi-light cihazı, ışık kaynağından gelen ışığın girişim spektroskopik filtreye çarptıktan sonra, filtre üzerindeki kaplamanın özelliklerinden dolayı kısa dalga boylu kısmın (ultraviyole ve mor mavi) yansıtılmasıdır. Filtre ışık kaynağına baktığında açı 45'tir. Eğildiğinde, objektif merceğe dikey olarak ateş eder ve numunenin uyarılması için objektif merceğinden numuneye ateş eder. Şu anda, objektif lens doğrudan bir ışık toplayıcı görevi görür. Aynı zamanda filtrenin uzun kısmı (yeşil, sarı, kırmızı vb.) filtreye şeffaf olduğundan objektif merceğin yönünde yansıma yapmaz ve filtre uyartım filtre plakası görevi görür, Numunenin flüoresanı, görünür ışığın uzun dalga boyu bölgesinde olduğundan, filtreden geçip gözlem için göz merceğine ulaşabilir, büyütme arttıkça flüoresan görüntünün parlaklığı artar ve iletilen ışıktan daha güçlüdür yüksek büyütmede kaynak. Bir transmisyon ışık kaynağı işlevine ek olarak, kalın dilimler, filtre zarları, koloniler ve doku kültürü örnekleri gibi opak ve yarı saydam örneklerin doğrudan gözlemlenmesi için daha uygundur. Son yıllarda geliştirilen yeni floresan mikroskoplarda çoğunlukla epi-floresan mikroskop adı verilen epi-light cihazları kullanılmaktadır.
