Stereo Floresan Mikroskop Kullanımı ve Önlemler
Talimatlar:
(1) Malzeme sayfasını sahneye yerleştirin.
(2) Floresan mikroskobunun voltaj dengeleyicisini açın. Ardından UV lambasını yakmak için başlat grubuna basın ve 15 dakika içinde kapatmayın ve kapatıldıktan sonra 3 dakika içinde tekrar çalıştırmayın.
(3) Uyarma filtresini v'ye, renk ayırma filtresini v'ye çevirin ve bir 495 veya 475nm engelleme filtresi seçin.
(4) Mikroskobik inceleme için uvFL40, uvFL100 floresan objektif mikroskobu seçin.
(5) Slayta flüoresan olmayan yağ ekleyin, önce 40 x kullanın ve ardından kontrol etmek için 100 x odaklama mikroskobu kullanın. Floresan görünür.
(7) Floresan maddelerin floresansı, ultraviyole ışıkla ışınlandıklarında zamanla kademeli olarak zayıfladığından, mikroskobik inceleme sırasında görüş alanı sık sık değiştirilmelidir.
(8) uvFL10 veya uvFL20 düşük büyütmeli mikroskoplar, malzemeleri incelemek için de kullanılabilir (düşük güçlü lensler kullanılırken flüoresan yağı eklenmez).
Floresan görüntüsünün kayıt yöntemi:
Floresan mikroskobu tarafından görülen floresan görüntüsü hem morfolojik özelliklere hem de floresan rengine ve parlaklığına sahiptir. Sonuçları değerlendirirken, kapsamlı bir yargı için ikisi birleştirilmelidir. Sonuçlar, sübjektif göstergelere, yani işçiler tarafından yapılan görsel gözleme dayalı olarak kaydedilir. Genel niteliksel bir gözlem olarak, temelde güvenilir. Teknoloji ve bilimin gelişmesiyle birlikte, hücre spektrofotometreleri, görüntü analizörleri ve diğer araçlar gibi, yargı sonuçlarını değişen derecelerde kaydetmek için nesnel göstergeler kullanılır. Ancak, bu araçlar tarafından kaydedilen sonuçlar da sübjektif yargılarla birleştirilmelidir.
Floresan görüntülerini kaydetmek için floresan mikroskop fotoğrafçılığı çok gereklidir. Floresanın solması ve zayıflaması kolay olduğundan, sonuçların gerçek zamanlı olarak kaydedilmesi gerekir. Yöntem temel olarak sıradan fotomikrografi ile aynıdır. ASA200 veya üstü veya 24. üstü gibi yüksek hızlı ışığa duyarlı film kullanmanız yeterlidir. Ultraviyole ışığın, FITC işaretleri gibi floresan söndürme üzerinde güçlü bir etkisi olduğundan, 30 saniye boyunca ultraviyole ışıkla ışınlandığında floresan parlaklığı yüzde 50 azalacaktır. Bu nedenle, pozlama hızı çok yavaşsa flüoresan görüntü alınamaz. Genel araştırma floresan mikroskopları yarı otomatik veya tam otomatik fotomikrografi sistem cihazlarına sahiptir.
Önlemler:
(1) Floresan mikroskobu fabrika talimatlarının gereksinimlerine kesinlikle uygun olarak çalışın ve programı istediğiniz zaman değiştirmeyin.
(2) Muayene karanlık bir odada yapılmalıdır. Karanlık odaya girdikten sonra güç kaynağını bağlayın ve ultra yüksek basınçlı cıva lambasını 5-15 dakika yakın. Işık kaynağından gelen güçlü ışık sabitlendikten sonra gözler tamamen karanlık odaya adapte olur ve ardından numuneyi gözlemlemeye başlar.
(3) Ultraviyole ışınlarının gözlere zarar vermesini önlemek için ışık kaynağı ayarlanırken koruyucu gözlük takılmalıdır.
(4) Muayene süresi tercihen her seferinde 1-2 saattir. 90 dakikayı aşarsa, ultra yüksek basınçlı cıva lambasının ışık yoğunluğu kademeli olarak azalacak ve floresan zayıflayacaktır; numune 3-5 dakika süreyle morötesi ışınlarla ışınlandıktan sonra, floresans da önemli ölçüde zayıflayacaktır; bu nedenle, en fazla 2-2 saati geçmemelidir. 3 saat
(5) Floresan mikroskobunun ışık kaynağının ömrü sınırlıdır ve zamandan tasarruf etmek ve ışık kaynağını korumak için numuneler toplu olarak incelenmelidir. Havalar sıcakken ısıyı dağıtmak için fanlar eklenmeli ve yeni ampuller kullanım sürelerinin başından itibaren kayıt altına alınmalıdır. Lamba söndükten sonra tekrar kullanmak istediğinizde, yakmadan önce ampulün yeterince soğumasını beklemelisiniz. Işık kaynağını günde birkaç kez aydınlatmaktan kaçının.
(6) Floresan zamanla kademeli olarak zayıflayacağından, boyamadan hemen sonra örneği gözlemleyin. Numune 4 derecede polietilen plastik torba içinde saklanırsa, floresan zayıflama süresi gecikebilir ve montaj maddesinin buharlaşması önlenebilir.
(7) Floresans parlaklığının değerlendirme standardı: genellikle dört seviyeye ayrılır, yani "bir" - floresans görülmez veya zayıf floresans görülmez. " artı "—Yalnızca açıkça görülebilen floresan görülebilir. "artı artı"—Görünür ve parlak
