Floresan mikroskop slaytlarının hazırlanması için gereklilikler
(1) Cam slayt
Slaydın kalınlığı 0,8 ila 1,2 mm arasında olmalıdır. Slayt çok kalınsa, bir yandan daha fazla ışık emecek, diğer yandan uyarı ışığının numune üzerinde toplanmasına izin vermeyecektir. Cam slayt pürüzsüz, tekdüze kalınlıkta olmalı ve belirgin bir kendiliğinden floresans içermemelidir. Bazen kuvars cam slaytlara ihtiyaç duyulur.
(2) Kapak camı slaytı
Kapak camının kalınlığı yaklaşık 0,17 mm'dir ve pürüzsüzdür. Uyarma ışığını arttırmak için girişim kaplama camı da kullanılabilir. Bu, farklı dalga boylarındaki ışık üzerinde farklı girişim etkilerine sahip olan birkaç madde katmanından (magnezyum florür gibi) oluşan, özel olarak tasarlanmış bir kapak camıdır. Yansıyan uyarım ışığı numuneyi harekete geçirebilirken, floresansın düzgün bir şekilde geçmesine izin verebilir.
(3) Numune
Doku dilimleri veya diğer örnekler çok kalın olmamalıdır. Çok kalın olmaları durumunda uyarım ışığının çoğu numunenin alt kısmında tüketilirken, objektif lens tarafından doğrudan gözlenen üst kısım tam olarak uyarılmaz. Ayrıca hücre örtüşmesi veya safsızlık maskelemesi muhakemeyi etkileyebilir.
(4) Sızdırmazlık maddesi
Gliserin, kendiliğinden floresans olmaması, renksiz ve şeffaf olması gereken bir montaj maddesi olarak yaygın olarak kullanılır. Floresan parlaklığı pH 8.5-9.5'te nispeten parlaktır ve hızlı bir şekilde kaybolması kolay değildir. Bu nedenle, pH değeri 9.0-9.5 olan eşit bir gliserol ve 0.5mol/L karbonat tampon karışımı, bir sızdırmazlık maddesi olarak yaygın olarak kullanılır.
(5) Ayna yağı
Numuneleri gözlemlemek için karanlık alan floresan mikroskobu ve yağ mikroskobu kullanıldığında ayna yağı kullanılmalıdır. Floresan olmayan özel ayna yağı kullanılabilir veya bunun yerine gliserol kullanılabilir. Sıvı parafin de kullanılabilir ancak kırılma indisi düşüktür ve görüntü kalitesi üzerinde hafif bir etkiye sahiptir.
