Mikroskop Prensipleri Mikrometre Hücre Boyutunun Belirlenmesi
Mikrobiyal hücrelerin boyutu, mikroorganizmaların sınıflandırılması ve tanımlanması için önemli temellerden biridir. Mikroorganizmalar çok küçüktür ve mikroskop yardımıyla gözlemlenmeleri gerekir. Mikrobiyal hücrelerin boyutunu ölçmek için ayrıca özel bir mikrometre yardımıyla mikroskop altında ölçülmeleri gerekir.
Mikroskop mikrometresi iki bölümden oluşur: kademeli mikrometre ve oküler mikrometre.
Kademeli mikrometre, ortasında bir gravür bulunan cam bir slayttır (Şek. 2-7). Ölçeğin toplam uzunluğu 1 mm'dir.
Mercek mikrometrelerini kalibre etmeye adanmıştır. Mercek mikrometresi, hücre boyutunu ölçmek için doğrudan kullanılabilir. Okülerdeki ayırıcının üzerine ölçüm için yerleştirilmiş, ortasında eşit bölünmüş dairesel bir cam slayttır (Şekil 2-8). Oküler mikrometre ölçeğinin toplam uzunluğu 1 cm'dir ve her biri 100 μm uzunluğunda 100 küçük hücreye bölünmüştür. Mercek mikrometresi, mikroskopla büyütüldükten sonra mikrobiyal hücrelerin görüntüsünün boyutunu ölçtüğü için, gerçek ölçek uzunluğu temsil eder. Kullanılan göz merceğinin ve objektif merceğin büyütme oranı ve merceğin uzunluğuna göre değişir. Bu nedenle, belirli bir büyütme altında oküler mikrometrenin her bir küçük hücresinin temsil ettiği uzunluğu bulmak için kullanmadan önce kademeli bir mikrometre ile kalibre edilmelidir. ve ardından ölçülen nesnenin boyutunu doğrudan ölçmek için mercek mikrometresini kullanın.
Bir oküler mikrometresi için kalibrasyon faktörünün hesaplanması: bir oküler mikrometre ölçeği (μ=sahne mikrometresindeki çift örtüşen çizgiler arasındaki bilinen mesafe / oküler mikrometreler cetvelin ölçeği arasındaki çift örtüşen çizgi m)
Örnek 1: Üst üste binen iki çizgi arasındaki bilinen mesafe 2 kademeli mikrometre ölçeği ise (2 X 10 μ
m), 13 oküler mikrometre ölçeğine karşılık gelir, ardından
Her oküler mikrometre ölçeği için düzeltme faktörü=20 μm / 13=1,54 μm
Örnek 2: 5 oküler mikrometre skalası uzunluğunda bir mikroskop oküler mikrometre ile bir mikroorganizma gözlenirse, o zaman
Mikrobiyal uzunluk=oküler mikrometresi ile ölçülen bölüm sayısı X her oküler mikrometre derecelendirmesi için düzeltme faktörü=5 X 1,54 μm=7,70 μm