Çeşitli faz kontrast mikroskoplarının kullanımına ilişkin notlar ve ipuçları
1) Faz kontrast cihazını kurun: sıradan bir mikroskobun kondansatör merceğini çıkarın ve halka şeklinde diyaframlı yoğunlaştırıcı merceği uygun bir mikroskop üzerine takın; mikroskobun sıradan objektif merceğini çıkarın ve faz plakalı objektif merceğiyle değiştirin; oküleri faz kontrast mikroskopları için Odaklayıcı okülerlerle değiştirin; ışık kaynağının ışık girişine özel yeşil filtreler (bazen gerekli değildir) yerleştirilir.
2) Işık hizalama ve odaklama: Odaklama merceğini ve kalınlık ayar vidasını, görüş alanında beyaz bir daire ve bir siyah daire açıkça görülene kadar ayarlayın. Siyah daire sabittir ve beyaz daire, kondansatör cihazındaki vidayı ayarlayarak hareket ettirilebilir, böylece siyah daire ve beyaz daire tamamen çakışır. Odaklama merceğini çıkarın ve kontrol etmek için mikroskobun orijinal oküleri ile değiştirin.
Faz kontrast mikroskobu kullanımındaki problemlerin analizi
1. Numune kalınlığının etkisi Faz kontrast gözlemi yapılırken, numunenin kalınlığı 5 μm veya daha ince olmalıdır. Daha kalın bir örnek kullanırken, örneğin üst katmanı çok nettir, ancak derin katman bulanıklaşacak ve faz kayması girişimine neden olacaktır. ve ışık saçılması.
2. Kapak camı ve slayt camın etkisi Numune bir kapak camı ile örtülmelidir, aksi halde dairesel diyaframın parlak halkası ile faz plakasının koyu halkasının üst üste binmesi zordur. Faz kontrast gözlemi, kayar cam ve kapak camının cam kalitesi konusunda da yüksek gereksinimlere sahiptir. Çizikler, eşit olmayan kalınlık veya düzgünsüzlük olduğunda, parlak halka bozulması ve faz girişimi meydana gelir. Ek olarak, sürgü çok kalın veya çok ince olduğunda halka şeklindeki diyaframın parlak halkası büyüyecek veya küçülecektir.
3. Halo ve solma etkisi Faz kontrast mikroskobunun görüntüleme sürecinde, bir yapı faz gecikmesinden dolayı karardığında, bu ışık kaybı değil, ışığın görüntü düzleminde yeniden dağılımının sonucudur. Böylece, karanlık alanlarda görünüşte kaybolan ışık, daha karanlık nesnelerin etrafında parlak bir hale olarak görünecektir. Bu, ince yapıların gözlemlenmesini engelleyen faz kontrast mikroskobunun bir dezavantajıdır ve halka şeklindeki diyafram çok dar olduğunda halo fenomeni daha ciddidir. Faz-kontrast mikroskobundaki diğer bir fenomen, faz kontrastı ile gözlemlendiğinde aynı faz gecikmesi ile daha geniş bir alanın kenarlarındaki kontrast kaybını ifade eden gölgeleme etkisidir.
4. Faz ters çevirme n'n olduğunda, görüntünün açık ve koyu kontrastı tam tersidir, buna faz ters çevirme denir. δ=0 faz farkı tanınmaz hale gelir ve δ artışıyla kontrast daha da artar ve δ belirli bir değere yükselmeye devam ettiğinde faz ters çevirme görünür. Yüzde 90 yüksek soğurma değerli (yüksek kontrast) objektif lens kullanırken, bu dönüşüm değeri yaklaşık 0,55λ'dır ve yüzde 70 standart soğurma değerli objektif lens kullanırken, yaklaşık 0,33λ'dır. . Daha küçük optik yol farklılıklarını çözmek için daha yüksek absorbans değerlerine sahip objektifler kullanılmalıdır.
