Mikrobiyal mikroskop doğrudan sayma yöntemi
Deneysel adımlar (mikrobiyal mikroskop doğrudan sayma yöntemi)
1. Seyreltme
Bira mayası süspansiyonunu uygun şekilde seyreltin. Bakteriyel çözelti konsantre değilse seyreltilmesine gerek yoktur.
2. Mikroskobik inceleme ve sayım odası
Numuneleri eklemeden önce sayım panosunun sayım bölmesinin mikroskobik incelemesini yapın. Kir varsa saymadan önce temizlenmesi gerekir.
3. Örnekleri ekleyin
Temiz ve kuru kan hücresi sayma plakasını bir kapak camıyla kapatın ve ardından steril, ince ağızlı bir damlalık kullanarak seyreltilmiş maya çözeltisinden küçük bir damlayı (çok fazla değil) kapak camının kenarından damlatın. Bakteriyel çözeltinin kılcal nüfuz yoluyla boşluk boyunca sayma odasına girmesine izin verin. Genel olarak sayma odası bakteriyel solüsyonla doldurulabilir. Baloncuk oluşturmamaya dikkat edin.
4. Mikroskobik sayma
5 dakika dinlendikten sonra kan hücresi sayma tahtasını mikroskop tablasına yerleştirin, önce sayım odasının yerini bulmak için düşük güçlü bir mikroskop kullanın ve ardından sayma için yüksek güçlü bir mikroskoba geçin. Sayım öncesinde bakteri solüsyonunun çok kalın veya çok ince olduğu tespit edilirse, sayım öncesinde seyreltme yeniden ayarlanmalıdır. Genel numune seyreltme gereksinimi, küçük hücre başına yaklaşık olarak 5-10 bakteri gövdesinin bulunması gerektiğidir. Sayım için her sayım odasından 5 hücre seçin (isteğe bağlı 4 köşe ve orta hücre). Izgara çizgisinde yer alan miselyum genellikle yalnızca üst ve sağ çizgilerde sayılır. Maya filizlenirse ve tomurcuğun boyutu ana hücrenin yarısına ulaşırsa iki bakteri sayımı yapılır. Bir numuneyi saymak için numunenin bakteri içeriği, iki sayım odasından elde edilen değerlere göre hesaplanmalıdır.
5. Kan hücresi sayma tahtasını temizleyin
Kullandıktan sonra kan hücresi sayma tahtasını su musluğundaki su kolonuyla yıkayın. Yıkamak için sert nesneler kullanmayın. Yıkadıktan sonra kendi başınıza havayla kurutun veya saç kurutma makinesiyle kurutun. Mikroskobik incelemede, her küçük hücrede artık bakteri cisimleri veya başka çökeltiler olup olmadığı gözlemlenir. Temiz değilse temizlenene kadar defalarca yıkanması gerekir.
