Floresan Mikroskobunda Parlak-Alan ve Karanlık-Alanı Görüntüleme Yöntemleri
(1) Yalnızca paraksiyal bölgede iletilen elektron ışınının objektif açıklıktan geçmesine izin vererek parlak bir arka plan üzerinde karanlık bir görüntü oluşturan parlak alan görüntüleme (BFI) yöntemi. Objektif açıklığının açıklığı ne kadar küçük olursa, parlak alan görüntüsünün kontrastı da o kadar büyük olur; (2) Karanlık alan görüntüleme (DFI), iletilen ışını bloke ederken, geniş açılı saçılmış ışının yalnızca bir kısmının veya kristalin belirli bir kırınım ışınının objektif açıklığından geçmesine izin veren bir tekniktir. Bu, karanlık bir arka plan üzerinde parlak bir grafik görüntü oluşturur. Bu karanlık alan görüntüleme yöntemi, görüntülerin kontrastını artırabilir ve önemli bir görüntüleme tekniğidir.
Leica floresans mikroskoplarını kullanarak karanlık alan görüntüleri elde etmenin kabaca dört yöntemi vardır: (1) objektif açıklığını hareket ettirirken optik eksen boyunca dikey aydınlatmayı korumak; (2) Optik eksen yönünde dağınık ışınları yakalamak için eğik aydınlatmanın kullanılmasına Merkezi Karanlık Alan Görüntüleme (CDFI) adı verilir; (3) Merkezi bir ışın durdurucusu ve dairesel bir şeffaf alanı olan bir objektif açıklığı; (4) Işığı algılamak için dairesel şeffaf yoğunlaştırıcı mercek ve objektif merceği için merkezi dairesel açıklık kullanın. Buradaki * yöntemi en basit olanıdır ancak distal kol bölgesinde elektronik görüntüleme kullanır, dolayısıyla sapma büyüktür ve görüntü kalitesi çok iyi değildir. İkinci yöntem yukarıdaki dezavantajları ortadan kaldırabilir, ancak Leica floresans mikroskobunun objektif açıklığı, dağılmış kırınıma uğramış elektronların yalnızca küçük bir kısmını alır ve bu da daha düşük verimle sonuçlanır. Açıklığın tarafı sıklıkla büyük miktarda elektron bombardımanına maruz kalır, bu da kolayca asimetrik kirlenmeye neden olabilir ve görüntü kalitesini etkileyebilir. Halka şeklindeki objektif merceği bu açıdan geliştirilmiştir ancak dezavantajı, üretilmesinin zor olması ve tam eksenel simetriye ulaşmanın zor olmasıdır. Aydınlatma sistemi için nispeten rahat gereksinimler göz önüne alındığında, numune için içi boş ışın aydınlatması sağlamak üzere yoğunlaştırıcıya halka şeklinde bir açıklık eklenmesini içeren ikinci çözüm benimsenebilir. Bu cihazın etkisi. Görüntü çözünürlüğü parlak alan görüntülerine yakın olabilirken, kontrast da büyük oranda iyileştirilmiştir.
