Apoptozu tespit etmek için tunel kullanılarak floresan mikroskopi sonuçları nasıl okunur?
1. Sonuçların gözlemlenmesinde üç noktaya dikkat edin; epi-projeksiyon yöntemi, çözünürlük projeksiyonu ve filtre işlemi. Özellikle:
Aydınlatma yöntemi genellikle episkopiktir, yani ışık kaynağı objektif mercek aracılığıyla numune üzerine yansıtılır;
Işık kaynağı ultraviyole ışıktır, dalga boyu daha kısadır ve çözünürlük sıradan mikroskoplardan daha yüksektir;
İki özel filtre vardır, ışık kaynağının önündeki görünür ışığı filtrelemek için kullanılır, mercek ile objektif merceği arasındaki filtre ise insan gözünü korumak için ultraviyole ışınları filtrelemek için kullanılır.
İkincisi, apoptozu tünel yoluyla ölçmek için kullanılan floresan mikroskop da bir tür optik mikroskoptur, temel fark, ikisinin uyarılma dalga boylarının farklı olmasıdır. Bu, floresan mikroskobu ile sıradan optik mikroskop arasındaki yapı ve kullanım açısından farkı belirler. Floresan mikroskobu, immünofloresan sitokimyada önemli bir araçtır. Işık kaynağı, filtre plakası sistemi ve optik sistem gibi ana bileşenlerden oluşur. Numuneyi floresans yaymak üzere uyarmak için belirli bir dalga boyunda ışık kullanmak ve objektif lens ve göz merceği sistemini güçlendirerek numunenin floresans görüntüsünü gözlemlemek.
3. Tünelde apoptozu ölçmek için floresans bastırılmış filtre plakası Bastırılmış filtre plakasının işlevi, uyarma ışığının geçişini tamamen engellemek ve karşılık gelen dalga boyu aralığında floresans sağlamaktır. Uyarma filtre plakasına karşılık olarak aşağıdaki üç tip preslenmiş filtre plakası yaygın olarak kullanılır:
Ultraviyole ışık baskı filtre plakası: Görünür ışığı geçirebilir ve ultraviyole ışığın geçmesini engelleyebilir. UG-1 veya UG-5 ile birleştirilebilir. Yaygın olarak kullanılan GG-3K430 veya GG-6K460.
Mor mavi ışık bastırma filtre plakası: 510 nm'nin üzerinde dalga boyuna sahip ışığı (yeşilden kırmızıya) geçirebilir ve BG-12 ile birleştirilebilir. Genellikle OG-4K510 veya OG-1K530 kullanılır.
Ultraviyole ışık presleme filtre plakası: 460 nm'nin (maviden kırmızıya) üzerinde dalga boyuna sahip ışığı geçirebilir, yaygın olarak kullanılan OG-11K470AK 490, K510 olan BG-3 ile birleştirilebilir.
