Floresan mikroskobunun lazer konfokal mikroskopiden farkı nedir?
Floresan mikroskobu
1, floresan mikroskobu, incelenecek nesneyi ışınlamak için kullanılan bir ışık kaynağı olarak ultraviyole ışık kullanmaktır, böylece floresan yayar ve daha sonra nesnenin şeklini ve mikroskop altında konumunu gözlemler. Floresan mikroskobu, kimyasal maddelerin hücrelerde emilimini, taşınmasını, dağılımını ve lokalizasyonunu incelemek için kullanılır. Hücredeki klorofil gibi bazı maddeler ultraviyole ışıkla ışınlandıktan sonra floresan ışık yayabilir; Kendi başlarına floresans veremeyen bazı maddeler vardır, ancak floresan boyalar veya floresan antikorlarla boyanırlarsa, ultraviyole ışıkla ışınlama sonrasında da floresans verebilirler ve floresans mikroskobu, bu tür maddelerin niteliksel ve niceliksel araştırmalarına yönelik araçlardan biridir.
2, floresan mikroskobu prensibi:
(A) ışık kaynağı: ışık kaynağı çeşitli dalga boylarında ışık yayar (ultraviyoleden kızılötesine).
(B) uyarma filtre kaynağı: numune aracılığıyla, belirli bir ışık dalga boyunda floresan üretebilir, aynı zamanda floresan gereksiz ışığın uyarılmasını bloke edebilir.
(C) Floresan numune: genellikle bir florokrom ile boyanır.
(D) Engelleme filtreleri: floresanı seçici olarak iletmek için numune tarafından emilmeyen uyarım ışığını bloke edin ve floresandaki bazı dalga boyları da seçici olarak iletilir. Işınlanmış nesnenin floresans vermesini sağlamak için ışık kaynağı olarak ultraviyole ışık kullanan bir mikroskop. Elektron mikroskobu ilk kez 1931'de Berlin, Almanya'da Knorr ve Haroska tarafından toplandı. Bu mikroskop, ışık ışını yerine yüksek hızlı elektron ışını kullanır. Elektron akışının dalga boyu, ışık dalgasından çok daha kısa olduğundan, elektron mikroskobunun büyütmesi 800,000 katına kadar çıkabilir, minimum çözünürlük 0,2 nanometredir. . 1963 yılında taramalı elektron mikroskobu kullanılmaya başlandı ve cismin minik yapısı yüzeyde görülebildi.
3, uygulama kapsamı: küçük nesnelerin görüntüsünü büyütmek için kullanılır. Genellikle biyoloji, tıp, mikroskobik parçacıklar ve diğer gözlemlerde kullanılır.
Konfokal mikroskop
Şekil 1'de, yola yansıyan ışık artı yarım yansıtıcı yarım mercekteki konfokal mikroskop, diğer yönlere katlanmış yansıyan ışığın merceğinden geçirilmiş olacak, odak noktasında iğne deliği olan bir bölme üzerinde delik yer alacak. odak noktası, bölmenin arkasında bir fotoçoğaltıcı tüptür. Bu eş odaklı sistem seti aracılığıyla dedektör ışığının odak noktasından önce ve sonra yansıyan ışığın küçük deliğe odaklanamayacağı, bölme tarafından engelleneceği hayal edilebilir. Yani fotometre odak noktasında yansıyan ışığın yoğunluğunu ölçer.
2, prensip: geleneksel optik mikroskop bir alan ışık kaynağı kullanır, numune üzerindeki her noktanın görüntüsü, ışığın komşu noktalardan kırılması veya saçılmasıyla engellenecektir; Lazer taramalı konfokal mikroskop, numune üzerindeki her noktanın taranmasının odak düzleminde numune üzerinde bir nokta ışık kaynağı oluşturmak için aydınlatıcı iğne deliğinden geçen bir lazer ışını kullanır, numune ışınlanır, görüntülemedeki iğne deliğinin tespitinde fotomultiplier tüp (PMT) veya soğuk elektrokaplin cihazı (cCCD) sonrasında iğne deliğinin nokta nokta veya nokta nokta veya nokta nokta tespit edilmesiyle ışık yoğunluğu bir fotometre ile ölçülür. cCCD) noktadan noktaya veya satır satır alır ve bilgisayar monitörü ekranında hızlı bir şekilde floresan bir görüntü oluşturur. Objektif merceğin odak düzlemine göre aydınlatma iğne deliği ve algılama iğne deliği eşleniktir, odak düzlemindeki nokta aynı zamanda aydınlatma iğne deliğine ve emisyon iğne deliğine odaklanır, odak düzleminin dışındaki nokta algılama iğne deliğinde olmayacaktır. Böylece eş odaklı görüntü optik kesitin örneği olur ve sıradan mikroskopların bulanık görüntülerinin eksikliklerinin üstesinden gelir.
3, Uygulama alanları: tıp, hayvan ve bitki araştırmaları, biyokimya, bakteriyoloji, hücre biyolojisi, doku embriyolojisi, gıda bilimi, genetik, farmakoloji, fizyoloji, optik, patoloji, botanik, sinir bilimi, deniz biyolojisi, malzeme bilimi, elektronik bilimi, mekanik, Petrol jeolojisi, mineraloji.