Floresan Mikroskobunun Konfokal Lazer Mikroskobudan Farkı
Floresan mikroskobu
1. Bir floresan mikroskobu, incelenen nesneyi floresans yaymak için aydınlatmak için bir ışık kaynağı olarak ultraviyole ışık kullanır ve ardından nesnenin şeklini ve konumunu mikroskop altında gözlemler. Floresan mikroskobu, hücrelerin içindeki maddelerin emilimini ve taşınmasını, ayrıca kimyasal maddelerin dağılımını ve konumlandırılmasını incelemek için kullanılır. Hücrelerdeki klorofil gibi bazı maddeler ultraviyole ışınlara maruz kaldıktan sonra floresan ışık saçabilir; bazı maddelerin kendisi floresans veremez, ancak floresan boyalar veya floresan antikorlarla boyanırlarsa, ultraviyole ışınlarla ışınlama sonrasında floresans verebilirler. Floresan mikroskobu, bu tür maddeler üzerinde niteliksel ve niceliksel araştırma araçlarından biridir.
2. Floresan mikroskobu prensibi:
(A) Işık kaynağı: Işık kaynağı çeşitli dalga boylarında (ultraviyoleden kızılötesine) ışık yayar.
(B) Uyarma filtresi ışık kaynağı: numunenin flüoresans vermesine neden olabilecek belirli bir dalga boyundaki ışığı iletir ve flüoresansı uyarmak için işe yaramayan ışığı engeller.
(C) Floresan numuneler: Genellikle floresan pigmentlerle boyanır.
(D) Engelleme filtresi: Numune tarafından absorbe edilmeyen uyarım ışığını engeller ve floresansı seçici olarak iletir. Floresansta bazı dalga boyları da seçici olarak iletilir. Aydınlatılan nesnenin floresans vermesine neden olmak için ışık kaynağı olarak ultraviyole ışık kullanan bir mikroskop. Elektron mikroskobu ilk kez 1931'de Berlin, Almanya'da Knorr ve Hallowska tarafından toplandı. Bu mikroskop, ışık ışını yerine yüksek hızlı elektron ışını kullanır. Elektron akışının dalga boyu ışığınkinden çok daha kısa olduğundan, elektron mikroskobunun büyütmesi 800,000 kata ulaşabilir ve minimum çözünürlük sınırı 0,2 nanometredir. 1963 yılında kullanılmaya başlanan taramalı elektron mikroskobu, insanların nesnelerin yüzeyindeki minik yapıları görmesini sağlıyor.
3. Uygulama kapsamı: Küçük nesnelerin görüntülerini büyütmek için kullanılır. Genellikle biyoloji, tıp, mikroskobik parçacıklar vb. gözlemlerinde kullanılır.
eş odaklı mikroskop
1. Konfokal mikroskop, yansıyan ışığın optik yoluna, mercekten geçen yansıyan ışığı diğer yönlere kıran yarı yansıtıcı bir yarı mercek ekler. Odak noktasında bir iğne deliği bulunan bir bölme vardır ve iğne deliği, bölmenin arkasında odak noktasında bir fotoçoğaltıcı tüp bulunur. Algılama ışığı odağından önce ve sonra yansıyan ışığın bu eş odaklı sistemden geçtiği ve küçük deliğe odaklanamadığı ve yönlendirici tarafından bloke edileceği düşünülebilir. Yani fotometrenin ölçtüğü şey, odakta yansıyan ışığın yoğunluğudur.
2. Prensip: Geleneksel optik mikroskoplar alan ışık kaynaklarını kullanır ve numune üzerindeki her noktanın görüntüsü, bitişik noktalardan gelen kırınım veya saçılan ışık tarafından engellenir; lazer taramalı eş odaklı mikroskoplar, numunenin içini aydınlatmak üzere aydınlatıcı iğne delikleri yoluyla nokta ışık kaynakları oluşturmak için lazer ışınlarını kullanır. Odak düzleminin her noktası taranır ve numune üzerindeki aydınlatılan nokta, algılamanın arkasındaki fotomultiplier tüp (PMT) veya soğuk birleştirme cihazı (cCCD) tarafından noktadan noktaya veya satır satır alınan algılama iğne deliğinde görüntülenir. İğne deliği ve bilgisayar monitörü ekranında hızla floresan bir görüntü oluşur. Aydınlatma iğne deliği ve algılama iğne deliği, objektif mercek odak düzlemine göre eşleniktir. Odak düzlemindeki noktalar aynı anda aydınlatma iğne deliğine ve emisyon iğne deliğine odaklanır. Odak düzleminin dışındaki noktalar algılama iğne deliğinde görüntülenmez. Bu, sıradan mikroskoplardaki bulanık görüntülerin eksikliklerinin üstesinden gelen, numunelerin optik kesitleri olan Konfokal görüntüler elde edilir.
3. Uygulama alanları: Tıp, hayvan ve bitki bilimsel araştırmaları, biyokimya, bakteriyoloji, hücre biyolojisi, doku embriyolojisi, gıda bilimi, genetik, farmakoloji, fizyoloji, optik, patoloji, botanik, sinir bilimi, deniz biyolojisi ve malzeme bilimi, elektronik bilimini içerir , mekanik, petrol jeolojisi, mineraloji.
