Floresan Mikroskobundaki Her Filtrenin İşlevleri
Floresan mikroskobu ile ilgili en kritik konu optik filtrelerin kombinasyonudur. Hem uyarma filtresi hem de koruyucu filtre, gözlemlenen floresan malzemeye uygun olmalı ve birbiriyle uyumlu olmalıdır. Bazı spesifik uygulamalarda filtre seçiminde hata yapılması yanlış anlaşılmalara ve hatta yanlış sonuçlara yol açabilir. Floresan mikroskobu teknolojisinin başarıları, yüksek-kaliteli filtrelerden ve akıllıca eşleştirilmiş filtre gruplarından ayrılamaz. Floresan mikroskobu için çeşitli filtre türleri vardır.
1. Isı emici filtre
Isı emici filtre, ışık kaynağı spektrumundaki termal radyasyonun optik sisteme zarar vermesini önlemek için gerekli bir filtredir. İlk gelişmiş mikroskoplar, ısı emici cihazlar olarak damıtılmış suyu tutabilen tambur şeklindeki şişelerle donatılmıştı. Modern büyük-ölçekli araştırma mikroskopları, ışık kaynağı ışık kutularında veya lamba odalarında şeffaf ve hafif sarı cam levhalardan oluşan cam ısı emici filtrelerle donatılmıştır. Leitz'in KG1 (2 mm) ve BG38 (4 mm) filtreleri, %98'e varan ışık iletim oranıyla neredeyse tüm ultraviyole ve görünür ışık spektrumlarını iletebilir. Yalnızca kızılötesi fototermal radyasyonu seçici olarak emer.
2. Uyarma filtresi
Uyarma filtreleri, uzun dalga boyundaki spektral çizgileri seçici olarak emebilir ve yalnızca ultraviyole ışığı iletebilir. Mor, mavi ve yeşil ışık filtreleri uyarma filtreleridir. Zeiss, Reichert, Olympus'un B serisi, G serisi, BG serisi, Shott'un UG serisi, Opton'un H, G, BP serisi, Leitz'in BP serisi ve diğer optik filtrelerin tümü uyarma filtreleridir.
3. Engelleme filtresi
Engelleme filtresi, kısa dalga spektral çizgilerini ve kızılötesi ışınları seçici olarak emerken daha uzun dalgaların görülmesine izin veren bir filtredir. İşlevi, gözlemcinin korneasını UV hasarından korurken, gözlemcinin incelenen nesne tarafından uyarılan floresansı görmesini sağlamaktır.
4. Renk ayırma filtresi
Renk ayırma filtresi, uyarı ışığını incelenen nesneye yansıtarak nesnenin floresans yaymasına neden olan ve ardından floresansı göz merceğine ileten bir filtre aynasıdır. Bu tip filtre yalnızca düşen ışık yoğunlaştırıcısında kullanılabilirken, iletilen ışıklı floresan mikroskobu renk ayrımı gerektirmez.
5. Girişim filtresi
Girişim filtresi, yüksek-performanslı bir uyarma filtresi türüdür. Birkaç ince metal filmin iki cilalı cam levha arasına istiflenmesiyle yapılan bir filtredir. Her ince metal filmin kırılma indisi farklıdır, bu nedenle aydınlatma ışık kaynağının çeşitli dalga boylarındaki spektral çizgileri her metal filme tekrar tekrar yansıtılır. Belirli dalga boylarındaki bazı spektral çizgiler yıkıcı girişim tarafından iptal edilirken, diğerleri ilave girişim ile güçlendirilir ve iletilir. Bu, dar bir iletim spektrumuna ve yalnızca 6-20 nm'lik bir yarım tepe genişliğine sahip bir filtre ile sonuçlanır. Geçirgenlik %60-70'e ulaşabilir.
