Floresan Mikroskopisi Teknik Parametreler Floresan Mikroskobu Teknikleri ve Yöntemleri
Floresan Mikroskop Teknik Parametreler 1. Geniş açılı oküler 2. Akromatik objektif lens 3. Dört delikli objektif lens dönüştürücü 4. Epi-floresan cihaz Mavi (B) Yeşil (G) uyarma sistemi 100W cıva lambası 5. Koaksiyel kaba ve ince odak ayar mekanizması: ayar Odak aralığı: 15mm Mikro hareket ızgara değeri: 0,002mm 6. Çift katmanlı mekanik tabla Boyuna hareket aralığı: 70mm Yanal hareket aralığı: 50mm
Floresan mikroskobu teknik parametreler
1. Geniş açılı mercek
2. Akromatik objektif lens
3. Dört açıklıklı burunluk
4. Epi-floresan cihazı mavi (B) yeşil (G) uyarma sistemi 100 W cıva lambası
5. Koaksiyel kaba ve ince odak ayar mekanizması: odak aralığı 15mm ince hareket ızgara değeri 0.002mm
6. Çift katmanlı mekanik tezgah
Dikey hareket aralığı: 70 mm Yanal hareket aralığı: 50 mm
Floresan Mikroskopi Becerileri ve Yöntemleri
(1) Cam sürgü
Cam sürgünün kalınlığı 0,8 ile 1,2 mm arasında olmalıdır. Çok kalın olan bir lam bir yandan daha fazla ışık emer ve diğer yandan uyarma ışığı numune üzerinde yoğunlaşamaz. Slaytlar pürüzsüz, tekdüze kalınlıkta ve belirgin otofloresans içermemelidir. Bazen kuvars cam slaytlar kullanılır.
(2) Kapak camı
Kapak camının kalınlığı yaklaşık 0,17 mm'dir, pürüzsüz. Uyarma ışığını güçlendirmek için, farklı dalga boylarındaki ışık üzerinde farklı girişim etkilerine sahip birkaç madde katmanıyla (magnezyum florür gibi) kaplanmış özel bir cam olan bir girişim camı da kullanılabilir. floresan sorunsuz gider. Heyecan verici ışık içinden geçirilir ve yansıtılır ve bu yansıyan uyarma ışığı numuneyi heyecanlandırır.
(3) Numune
Doku dilimleri veya diğer örnekler çok kalın olmamalıdır. Çok kalınsa, uyarma ışığının çoğu örneğin alt kısmında tüketilirken, objektif lens tarafından doğrudan gözlemlenen üst kısım tam olarak uyarılmayacaktır. Ayrıca, hücre örtüşmesi veya safsızlık örtüsü, yargıyı etkiler.
(4) Montaj maddesi
Gliserin, otofloresans içermemesi gereken, renksiz ve şeffaf olması gereken bir montaj maddesi olarak yaygın olarak kullanılır ve flüoresanın parlaklığı pH 8.5-9.5'te daha parlaktır ve hızla solması kolay değildir. Bu nedenle, gliserol ve pH'ı 9.0 ila 9.5 olan 0.5mol/l karbonat tampon çözeltisinin eşit bir karışımı genellikle birleştirme maddesi olarak kullanılır.
(5) ayna yağı
Genel olarak, karanlık alan floresan mikroskopları ve yağa daldırmalı daldırma lensleri ile numuneleri gözlemlerken, immersiyon yağı kullanılmalıdır. Floresan içermeyen özel daldırma yağı kullanmak en iyisidir. Bunun yerine yukarıdaki gliserin de kullanılabilir ve sıvı parafin de kullanılabilir, ancak kırılma indeksi düşüktür ve bu da görüntü kalitesi üzerinde hafif bir etkiye sahiptir. Etkilemek.
Floresan mikroskobunun prensibi ve yapısal özellikleri
Floresan mikroskobu, numunedeki flüoresan maddeleri floresan yaymak üzere uyarmak için uyarma ışığı olarak filtre sisteminden belirli bir dalga boyundaki ışığı (3650 inç morötesi ışık veya 4200 inç mor mavi ışık gibi) yaymak için yüksek ışık verimliliğine sahip bir nokta kullanır. çeşitli renkler Bundan sonra, objektif merceğin ve okülerin büyütülmesiyle gözlemleyin. Bu sayede, güçlü kontrastlı bir arka plan altında, floresan çok zayıf olsa bile, tanımlanması kolaydır ve yüksek hassasiyete sahiptir. Esas olarak hücre yapısı ve işlevi ile kimyasal bileşimin araştırılması için kullanılır. Floresan mikroskobunun temel yapısı, sıradan bir optik mikroskop ve bazı aksesuarlardan (floresan ışık kaynağı, uyarma filtresi, iki renkli ışın ayırıcı ve bloke edici filtre, vb.) oluşur. Floresan ışık kaynağı—genellikle çeşitli dalga boylarında ışık yayan ultra yüksek basınçlı cıva lambası (50-200W) kullanılır, ancak her floresan maddenin en güçlü floresanı üreten bir uyarma dalga boyu vardır, bu nedenle bir uyarma filtresi (Genellikle, ultraviyole, mor, mavi ve yeşil uyarma filtreleri vardır), bunlar yalnızca belirli bir dalga boyundaki uyarma ışığının diğer ışığı emerken numunenin içinden geçmesine ve ışınlamasına izin verir. Her bir madde uyarma ışığı ile ışınlandıktan sonra çok kısa bir süre içinde ışınlama dalga boyundan daha uzun dalga boyuna sahip görünür floresans yayar. Floresan spesifiktir ve genellikle uyarma ışığından daha zayıftır. Spesifik flüoresanı gözlemlemek için, objektif merceğin arkasına engelleme (veya bastırma) eklenmeli ve onunla birlikte kullanılmalıdır.
Floresan mikroskobu ve sıradan mikroskop arasındaki fark
1. Aydınlatma yöntemi genellikle episkopiktir, yani ışık kaynağı, objektif merceğinden numune üzerine yansıtılır;
2. Işık kaynağı ultraviyole ışıktır, dalga boyu daha kısadır ve çözünürlük sıradan mikroskoplardan daha yüksektir;
3. İki özel filtre vardır, ışık kaynağının önündeki filtre görünür ışığı filtrelemek için kullanılır ve mercek ile objektif merceği arasındaki filtre, insan gözünü korumak için ultraviyole ışınları filtrelemek için kullanılır.
Floresan mikroskobu aynı zamanda bir tür optik mikroskoptur, temel fark, ikisinin uyarma dalga boyunun farklı olmasıdır. Bu, yapı ve kullanım açısından floresan mikroskobu ile sıradan optik mikroskop arasındaki farkı belirler.
Floresan mikroskopi, immünofloresan sitokimyada önemli bir araçtır. Işık kaynağı, filtre plaka sistemi ve optik sistem gibi ana bileşenlerden oluşur. Numuneyi floresan yayması için uyarmak için belirli bir dalga boyunda ışık kullanmak ve objektif lensi ve oküler sistemini güçlendirerek numunenin floresan görüntüsünü gözlemlemek içindir.
