Floresan mikroskobu prensipleri ve yapısal özellikleri
Floresan mikroskobu, uyarma ışığı olarak belirli bir dalga boyunda ışık (örneğin ultraviyole 3650 veya mor-mavi 4200 gibi) yaymak için renk sisteminin filtrelenmesi yoluyla noktanın yüksek parlaklık verimliliğinin kullanılmasıdır. Numune içindeki floresan malzemenin çeşitli farklı renkleri floresans yayar ve daha sonra gözlem için objektif ve göz mercekleri aracılığıyla büyütülür. Bu şekilde, güçlü kontrast arka planda, floresans çok zayıf olsa bile, tanımlanması kolaydır, yüksek hassasiyet, esas olarak hücre yapısı, fonksiyonu ve kimyasal bileşimin incelenmesi için kullanılır. Bir floresan mikroskobunun temel yapısı, sıradan bir optik mikroskop artı bazı aksesuarlardan (floresan ışık kaynağı, uyarma filtreleri, çift renkli ışın ayırıcı ve engelleme filtreleri vb.) oluşur. Floresan ışık kaynağı - genellikle çeşitli dalga boylarında ışık yayabilen ultra yüksek basınçlı cıva lambası (50-200W) kullanılır, ancak her floresan malzeme en güçlü floresan uyarma dalga boyuna sahiptir, bu nedenle uyarma filtreleri ekleme ihtiyacı (genellikle ultraviyole, mor, mavi ve yeşil uyarma filtresi), böylece numunelerin ışınlanması yoluyla uyarma ışığının yalnızca belirli bir dalga boyu, diğer ışık ise emilir. Bu nedenle, bir uyarma filtresinin (genellikle ultraviyole, mor, mavi ve yeşil uyarma filtreleri) eklenmesi gerekir, böylece uyarı ışığının yalnızca belirli bir dalga boyu numune boyunca emilirken diğer ışık emilir. Her madde uyarma ışığıyla ışınlandığında, çok kısa bir süre içinde ışınlanan ışığın dalga boyundan daha uzun bir dalga boyunda görünür floresans yayar. Floresansın özgüllüğü vardır, genellikle uyarma ışığından daha zayıftır, belirli floresansın gözlemlenebilmesi için, engelleme (veya bastırma) ekleme ihtiyacının arkasındaki objektif lensin kullanılacak şekilde seçilmesi gerekir.
Floresan mikroskobu ve sıradan mikroskop farkı
1. Aydınlatma yöntemi genellikle düşüyor, yani ışık kaynağı objektif mercek aracılığıyla numuneye yansıtılıyor;
2. Işık kaynağı, sıradan mikroskoplara göre daha kısa dalga boyuna ve daha yüksek çözme gücüne sahip ultraviyole ışıktır;
3. İki özel filtre vardır, ışık kaynağının önündeki görünür ışığı filtrelemek için kullanılır, mercek ile objektif lens arasındaki filtre ise insan gözünü korumak için ultraviyole ışığı filtrelemek için kullanılır.
Floresan mikroskobu da bir tür optik mikroskoptur, temel fark, ikisinin uyarılma dalga boyunun farklı olmasıdır. Bu, floresan mikroskobu ve sıradan optik mikroskop yapısını ve farklı yöntemlerin kullanımını belirler.
Floresan mikroskobu immünofloresan sitokimyanın temel aracıdır. Işık kaynağı, filtre plakası sistemi ve optik sistem ve diğer ana bileşenlerden oluşur. Numunenin floresans görüntüsünü gözlemlemek için objektif lens ve göz merceği sistemi aracılığıyla büyütülen floresans yaymak üzere numuneyi uyarmak için belirli bir dalga boyu ışık kullanır.
