Floresan mikroskobu tespit yöntemi
floresans mikroskobu
Floresan mikroskobu immünofloresan sitokimya için temel bir araçtır. Işık kaynağı, filtre plakası sistemi ve optik sistem gibi ana bileşenlerden oluşur. Numuneyi uyarmak ve numunenin flüoresans görüntüsünü gözlemlemek için bir objektif ve göz merceği sistemi aracılığıyla büyütülen flüoresans yaymak için belirli bir dalga boyunda ışık kullanır (Şekil 1).
(1) Işık kaynağı
Günümüzde ışık kaynağı olarak yaygın olarak 200W'lık ultra yüksek basınçlı cıva lambası kullanılmaktadır. Ortası küresel şekilli ve içi belli miktarda cıva dolu kuvars camdan yapılmıştır. Çalışma sırasında iki elektrot arasındaki deşarj civanın buharlaşmasına neden olur ve küre içindeki basınç hızla artar. Cıva tamamen buharlaştığında, 50-70 standart atmosfer basıncına ulaşabilir ve bu genellikle yaklaşık 5-15 dakika sürer. Ultra yüksek basınçlı cıva lambalarının ışıldaması, cıva moleküllerini sürekli olarak ayrıştıran ve azaltan ve fotonlar yayan elektrotlar arasındaki deşarjın sonucudur. Çeşitli floresan maddeleri uyarmak için yeterli olan güçlü ultraviyole ve mavi mor ışık yayar, bu nedenle floresan mikroskoplarında yaygın olarak kullanılır.
Floresan mikroskobu kullanımına ilişkin önlemler
(1) Floresan mikroskop fabrikasının talimatlarına kesinlikle uyun ve programı keyfi olarak değiştirmeyin.
(2) Muayene karanlık bir odada yapılmalıdır. Karanlık odaya girdikten sonra gücü bağlayın ve ultra yüksek basınçlı cıva lambasını 5-15 dakika boyunca yakın. Işık kaynağı güçlü bir ışık yayıp sabitlendikten sonra, numuneyi gözlemlemeye başlamadan önce gözlerin karanlık odaya tamamen uyum sağlaması gerekir.
(3) UV ışınlarının gözlere zarar vermesini önlemek için ışık kaynağı ayarlanırken koruyucu gözlük takılmalıdır.
(4) Denetim süresi her seferinde 1-2 saat olmalıdır. 90 dakikayı aşarsa ultra yüksek basınçlı cıva lambasının ışık şiddeti giderek azalır ve floresans zayıflar; 3-5 gün boyunca ultraviyole radyasyona maruz kalan örnekler
Dakikadan sonra floresans da önemli ölçüde azaldı; Bu nedenle maksimum süre 2-3 saati aşmamalıdır.
(5) Floresan mikroskop ışık kaynağının ömrü sınırlıdır ve zaman kazanmak için numune merkezi olarak incelenmelidir.
Zamandan tasarruf edin ve ışık kaynağını koruyun. Hava sıcak olduğunda ısıyı dağıtmak ve serinlemek için elektrikli fan eklenmelidir. Yeni bir ampul değiştirilirken kullanım süresi baştan kaydedilmelidir. Işık kapatıldığında ve tekrar kullanmak istediğinizde, ampulü ateşlemeden önce yeterince soğumasını beklemelisiniz. Işık kaynağını günde birkaç kez aydınlatmaktan kaçının.
(6) Floresans zamanla giderek zayıflayacağından, boyamadan hemen sonra numuneyi gözlemleyin. Numunenin 4 derecede bir polietilen plastik torba içinde saklanması durumunda, floresan zayıflama süresini geciktirebilir ve montaj maddesinin buharlaşmasını önleyebilir.
(7) Floresan parlaklığına ilişkin karar kriterleri genel olarak dört düzeye ayrılır; yani "bir" - zayıf floresan yok veya görünür zayıf floresan. "+" - Yalnızca görünür floresans görülebilir. ++- Parlak floresansla görünür. "+++" - Görünür ve göz kamaştırıcı floresans.
