Floresan mikroskobu ipuçları ve püf noktaları
(i) Slaytlar
Lamın kalınlığı 0.8 ila 1.2 mm arasında olmalıdır, eğimlerin çok kalın olması bir yandan daha fazla ışık emilimi sağlarken diğer yandan toplanan numunede ışığın uyarılmasını sağlayamaz. Slayt düzgün, düzgün kalınlıkta olmalı ve belirgin bir otofloresans olmamalıdır. Bazen kuvars cam slaytlara ihtiyaç duyulur.
(ii) Lameller
Yaklaşık 0,17 mm lamel kalınlığı, temiz. Uyarma ışığını arttırmak için, farklı dalga boylarında ışık katmanları ile kaplanmış özel bir yüzey olan lamel ile müdahale etmek için de kullanılabilir ve maddelerin (magnezyum florür gibi) müdahalesinde farklı bir rol oynar. Işığın pürüzsüz ve yansıtıcı uyarımı yoluyla floresans oluşturabilen lamel, ışığın yansıyan uyarımı numune kadının uyarılması olabilir.
(iii) numuneler
Doku kesitleri veya diğer numuneler çok kalın olamaz; örneğin çok kalın uyarma ışığı çoğunlukla numunenin alt kısmında tüketilir ve objektif mercek doğrudan yetersiz uyarmanın üst kısmında gözlenir. Ek olarak, hücre örtüşmesi veya safsızlıkların maskelenmesi, muhakemeyi etkiler.
(D) sızdırmazlık maddesi
Sızdırmazlık maddesi yaygın olarak kullanılan gliseroldür, otofloresans içermemeli, renksiz ve şeffaf olmalıdır, pH 8.5 ~ 9.5'teki floresansın parlaklığı daha parlaktır, hızlı bir şekilde kaybolması kolay değildir. Bu nedenle sızdırmazlık maddesi olarak yaygın olarak gliserin ve 0.5mol/lpH9.0 ~ 9.5 karbonat tamponunun eşit miktardaki karışımı kullanılır.
(E) ayna yağı
Genel karanlık alan floresan mikroskobu ve yağlı ayna numunesi gözlemi, tercihen özel floresan olmayan ayna yağı kullanılarak ayna yağı kullanılmalıdır, yukarıda belirtilen gliserol yerine de kullanılabilir, sıvı parafin de kullanılabilir, ancak kırılma indeksi alttan, görüntünün kalitesini biraz etkiler.
