Doğrudan mikrobiyolojik sayma yöntemi
Mikroskop altında mikroorganizmaları doğrudan saymak için bir hemositometre kullanmak, mikrobiyal sayım için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Bu yöntemin avantajı sezgiselliği ve hızıdır. Hemositometre slaydı ve kapak slaytı arasındaki sayım odasına uygun şekilde seyreltilmiş bakteriyel süspansiyon (veya spor süspansiyonu) yerleştirin ve bir mikroskop altında sayın. Sayma odasının sabit hacmi nedeniyle (0. 1mm2), birim hacim başına toplam mikroorganizma sayısı, mikroskop altında gözlenen mikroorganizma sayısına göre dönüştürülebilir. Bu yöntemin canlı ve ölü bakteriyel hücrelerin toplamını hesaplaması nedeniyle, toplam bakteriyel sayı yöntemi olarak da bilinir.
Bir kan hücresi sayma plakası genellikle üç platform oluşturan dört oluklu özel olarak tasarlanmış bir cam slayttır. Orta platform, kısa bir yatay olukla ikiye bölünür ve platformun her iki tarafı bir ızgara ile kazınır. Her ızgara dokuz büyük kareye ayrılır ve ortadaki büyük kare, mikrobiyal sayımın gerçekleştirildiği sayım odasıdır.
Sayım odasının ölçeği için genellikle iki özellik vardır. Birincisi, büyük bir karenin 16 orta kareye bölünmesi ve her orta kare ayrıca 25 küçük kareye bölünmesidir (Şekil VIII -2); Başka bir yöntem, büyük bir kareyi 25 orta kareye bölmektir ve her orta kare ayrıca 16 küçük kareye bölünür (Şekil VIII -1, c). Ancak sayma kartının boyutuna bakılmaksızın, her büyük karedeki küçük karelerin sayısı aynıdır, yani 16 × 25=400 küçük kareler.
Her büyük karenin yan uzunluğu 1 mm ise, her büyük karenin alanı 1mm2'dir. Bir kapak camıyla örtüldükten sonra, slayt ve kapak camı arasındaki yükseklik 0. 1mm'dir, böylece sayma odasının hacmi 0. 1mm3'tür.
Sayım yaparken, beş karedeki toplam bakteri sayısı genellikle sayılır ve daha sonra her bir karenin ortalama değeri elde edilir. 16 veya 25 ile çarpmak, büyük bir karedeki toplam bakteri sayısını verir, bu da daha sonra 1ml bakteriyel çözelti içindeki toplam bakteri sayısına dönüştürülür.
