Mikroorganizma sayısının belirlenmesi - mikroskobik doğrudan sayma yöntemi!
Esas
Mikroskobik doğrudan sayma yöntemi, test edilecek numunenin küçük bir miktarının belirli bir alanı ve hacmi olan özel bir cam slayt (aynı zamanda bakteri sayacı olarak da bilinir) üzerine süspansiyonunun yerleştirildiği ve doğrudan altında sayıldığı basit, hızlı ve sezgisel bir yöntemdir. bir mikroskop. Şu anda yurt içinde ve yurt dışında yaygın olarak kullanılan bakteri sayaçları şunları içerir: kan hücresi sayma tahtası, Peteroff-Hauser bakteri sayacı ve Hawksley bakteri sayacı vb. Bunların tümü maya, bakteri ve küf sporları gibi süspansiyonları saymak için kullanılabilir ve temel prensipler aynıdır. Son iki bakteri sayacının bir kapak camı ile kaplandıktan sonra toplam hacmi 0.{02 mm3'tür ve kapak camı ile slayt arasındaki mesafe yalnızca 0,02 mm'dir, bu nedenle aşağıdaki gibi küçük hücreler vardır: bakteriler yağa batırılmış objektif lensle gözlemlenebilir ve sayılabilir. Bu bakteri sayaçlarının kullanılmasının yanı sıra, smear alanının görme alanı alanına oranının mikroskop altında doğrudan gözlemlenmesine yönelik bir tahmin yöntemi de bulunmaktadır. Bu yöntem genellikle sütün bakteriyolojik incelemesinde kullanılır. Mikroskopla doğrudan sayma yönteminin avantajı sezgisel, hızlı ve kullanımının kolay olmasıdır. Ancak bu yöntemin dezavantajı, ölçülen sonuçların genellikle ölü ve canlı bakterilerin toplamı olmasıdır. Günümüzde bu eksikliğin üstesinden gelmek için, mikro hazne kültürünü boyayan canlı bakterilerin birleştirilmesi (kısa süreli) ve yalnızca canlı bakterilerin sayılması amacına ulaşmak için hücre bölünmesi inhibitörlerinin eklenmesi gibi bazı yöntemler bulunmaktadır.
Bu deneyde, mikroskop altında doğrudan sayımı gerçekleştirmek için örnek olarak hemasitometre kullanıldı. Diğer iki bakteri sayacının kullanım yöntemleri için lütfen her üreticinin talimatlarına bakın. Hemasitometre ile mikroskop altında doğrudan sayım, yaygın olarak kullanılan bir mikrobiyal sayma yöntemidir. Sayma tahtası, üzerinde dört yuvanın üç platform oluşturduğu özel olarak yapılmış bir cam slayttır; ortadaki daha geniş platform, kısa bir yatay yarık ile ikiye bölünmüştür ve platformun her iki tarafı bir ızgara ile sıralanmıştır. Her ızgara dokuz büyük kareye bölünmüştür ve ortadaki büyük kare sayma odasıdır. Sayım odasının ölçeği genellikle iki özelliğe sahiptir; birincisi, büyük bir karenin 25 orta kareye bölünmesi ve her orta karenin 16 küçük kareye bölünmesidir; diğeri ise büyük bir karenin ortadaki 16 kareye bölünmesi ve her ortadaki karenin 25 küçük kareye bölünmesidir, ancak sayma tahtasının türü ne olursa olsun, içinde 400 küçük kare vardır. her biri büyük kare. Her büyük karenin kenar uzunluğu 1 mm ve her büyük karenin alanı 1 mm2 olur. Kapak camı kaplandıktan sonra kapak camı ile kayar cam arasındaki yükseklik 0,1 mm olur, yani hacmi sayma odası 0,1 mm'dir (mililitrenin on binde biri).
